葡萄成熟果实外源激素多效唑和PBO残留研究.docVIP

葡萄成熟果实外源激素多效唑和PBO残留研究 　　摘 要：采用高效液相法对喷施不同浓度多效唑和PBO的葡萄果实进行残留量研究。试验用80%的甲醇提取样品中的多效唑和PBO，减压蒸馏后再用二氯甲烷萃取，旋转蒸发至干后以无水甲醇溶解后上机。经过高效液相色谱仪对标样及样品溶液的测定后，计算不同样品葡萄中的多效唑和PBO含量残留并比较。结果发现，不同浓度多效唑喷施后均未检测到残留，而PBO有少量残留。由此表明，在葡萄设施栽培中，在一定浓度范围内，采用外源激素喷施法来提高葡萄产量和品质不会影响葡萄的食用安全性。 　　关键词：葡萄；多效唑；PBO；残留 　　近年来植物生长调节剂在葡萄生产中广泛应用，极大提高了葡萄的产量和品质。植物生长调节剂在葡萄的无核化、促进生根、控制生长、保花保果、增加产量、提高浆果品质、延长或打破休眠、防止或促进脱落等方面，都发挥着重要的作用[1-2]。 　　多效唑是英国ICI公司在20世纪70年代末、80年代初推出的一种高效、低毒的植物生长延缓剂，兼有广谱内吸杀菌作用[3]。生产上应用多效唑能较好地控制葡萄副梢生长，缩短节间长度，增加叶片厚度，提高坐果率，使果穗生长紧凑，增加单位面积产量，尤其是在控制夏梢生长、减少夏季修剪工作量方面有明显的作用[4]。PBO是一种新型果树促控制剂，含细胞分裂素、生长素衍生物ORE、增糖着色剂、延缓剂及10多种营养元素组成[5]。PBO应用于葡萄，可促进其植株生长，加快有机物运输，促进枝条发育成熟和花芽分化，有较强的壮树功效和潜在的增产能力[6]。 　　本研究在葡萄不同生长时期喷洒不同浓度的多效唑可湿性粉剂和PBO后，通过高效液相色谱法测定葡萄果实中这2种生长调节剂的残留量，以确定最佳的喷洒时间和浓度。试验结果有利于在施用外源生长调节剂提高葡萄产量和品质的同时，尽可能地降低其负作用，减少对环境、人体的危害。 　　1 材料和方法 　　1.1 多效唑和PBO喷施试验 　　葡萄品种为巨峰，试验地点位于慈溪市新浦镇现代农业示范园区。试验配制了不同浓度的多效唑和PBO，喷施到处于不同生长期的葡萄嫩梢，具体处理如表1所示。 　　1.2 葡萄果实预处理 　　上述9种处理葡萄果实成熟后进行取样，每种处理取50颗，置-80℃的冰箱中保存。 　　在检测前，将冰箱中的葡萄果实置烧杯中常温解冻，去掉葡萄皮和葡萄籽，称取25.0g果肉放入研钵中，加入石英砂和少量的抗氧化剂研磨至成匀浆状态；加30 mL 80%的甲醇水溶液浸泡30 min、搅拌10 min后抽滤，残渣中加入30 mL 80%的甲醇水溶液。重复上述操作。合并2次滤液，减压蒸馏至干，加入15 mL二氯甲烷萃取，震荡半小时后离心，取有机相，重复上述操作2次，用蒸馏水洗2～3次以除去水溶性杂质，有机相经过无水硫酸钠脱水后，旋转蒸发至干，加2.0 ml无水甲醇溶液洗脱，定容，过滤除去杂质后上机。 　　1.3 多效唑和PBO含量检测与计算 　　高效液相色谱（Agilent1100）条件如下：色谱柱：ODS-C18柱（250×4.6mm）； 流动相∶75%甲醇水溶液；柱温：30℃；流速：1.0mL/min；pH值3.2（用碳酸氢钠或碳酸钠调节流动相pH）；波长：268nm。首先开高效液相色谱通仪通入清水洗30min，然后通入流动相洗20min。清洗后开始进行正式的进样，首先进行平衡，然后把浓缩液用50mL的针管打入，掰下进样口开关，开始跑样。根据表样的出峰时间确定了ABA为最晚出峰。出峰时间为5.034min。等到10min完全跑样后，停止，保存报告，平衡再进下一个样。 　　分别取50mL、100mL容量瓶各1个，洗净，称取0.01g标准样品，配制成50μg/mL和100μg/mL的标准溶液。标样进行HPLC检测后，以标样峰面积为纵坐标，标样浓度为横坐标，绘制标准曲线。 　　根据标准曲线和样品HPLC峰面积，可计算得到样品中的目标物浓度，所得浓度乘以稀释倍数的值再乘以原先浓缩体积除以样品质量即为目标物质含量。 　　2 结果与分析 　　2.1 葡萄果实中多效唑的残留量 　　本试验对不同时间喷施不同浓度多效唑后果实中的残留量进行了HPLC分析，其中不同浓度标准对照品的HPLC图谱见图1。2个浓度多效唑标准品的色谱波峰分别出现在4.763min和4.693min左右，两者差异不大。 　　1号样品是没有喷过15%多效唑可湿性粉剂的葡萄果实。从图2-1可看出，在4.693min或者4.763min的点上或者在其0.1差值范围内均未出现特异性波峰，由此可以推断，在诸多的波峰中并没有多效唑的波峰。说明此样品中无多效唑残留。 　　2号样品是在初花期，用150mg/L的15%多效唑可湿性粉剂喷葡萄嫩梢的葡萄样品。从图2-2可明显看出，波峰相