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蓝莓茎段无性快繁技术研究 　　摘 要：以蓝莓茎段作为外植体，通过组织培养技术研究筛选出最适宜蓝莓无性快繁的诱导培养基、继代培养基和生根培养基。结果表明：蓝莓最合适诱导培养基为改良WPM+ZT 2.0mg/L，诱导率达到了57.5%；最适宜的继代培养基为改良WPM+ZT 1.0 mg/L +IBA 0.2 mg/L，继代增殖倍数达到3.65；经1/2WPM+IBA 0.2 mg/L培养基处理移栽的组培苗成活率最高，达到了82.5%。 　　关键词：蓝莓；茎段；无性快繁 　　蓝莓（Blueberry），又名越橘、蓝浆果，属杜鹃花科（Ericaceae）越桔亚科（Vaccinioideae）越桔属（Vacciniodeae）植物，为多年生落叶或常绿灌木或小灌木，是一种小浆果类果树。蓝莓果实富含花青苷、低糖、低脂肪，抗氧化能力列所有果品、蔬菜之首，具有延缓脑神经衰老，解除眼睛疲劳并增加视力，增强心脏功能和抗癌的独特功效，被国际粮农组织列为人类五大健康食品之一[1]，具有较高的经济价值和广阔的开发前景。 　　随着蓝莓栽培面积的逐步扩大，其良种苗木需求量急剧增加，常规育苗方法短期内很难满足生产的需要。据前人研究表明，组培苗较常规繁育的苗木在生长势、果实品质等诸多方面有优势。利用组织培养技术可在较短时间内快速高效地获得大量蓝莓无性系组培苗，对加速蓝莓良种繁育和推广种植有一定的实用意义。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料 　　供试材料为从浙江引进的蓝莓。 　　1.2 试验方法 　　1.2.1 外植体的采集及处理。选择连续放晴3天的午后，采集蓝莓当年生健壮的萌芽条，作为外植体进行快繁。对采下的萌芽株剪去叶片，先用3%洗衣粉液浸泡5min，再用自来水冲洗3～4次后，然后剪成每段带1～2节位的长2cm左右的茎段，备用。 　　1.2.2 外植体的消毒。将外植体放在超净工作台，先用75%的酒精浸泡10s，无菌水冲洗2～3次，再用1g/L升汞溶液消毒8～10min，再用无菌水冲洗5～6次，切除消毒后的伤口，再用无菌吸水纸吸干表面的水珠，斜接入诱导培养基中培养，培养条件：温度（25±1）℃，光照强度1500～2000lx，光照时间12h/d。 　　1.2.3 不同ZT浓度对蓝莓诱导培养的影响。以改良WPM为基本培养基，添加ZT1.0、2.0、3.0mg/L的浓度作为诱导培养基，培养基附加白糖20g/L，琼脂12g/L，pH值5.2。每种培养基各配制40瓶，每瓶接入1个茎段，在培养室内光照培养，培养35d后，统计茎段诱导率及其芽生长情况。 　　1.2.4 不同激素浓度组合对蓝莓继代培养的影响。以改良WPM为基本培养基，设置激素浓度组合为ZT 1.0+IBA 0.1、ZT 1.0+IBA 0.2和ZT 1.0+IBA 0.3mg/L3个处理，每个处理接入40个茎段，培养35天后，统计蓝莓继代增殖倍数及其芽生长情况。 　　1.2.5 不同IBA浓度对蓝莓生根培养的影响。选择健壮的继代苗，接入以1/2WPM为基本培养基，IBA 浓度为0.1、0.2 、0.3mg/L3个处理的培养基中，瓶内培养15d后扦插到苔藓中进行瓶外生根培养试验。培养28d后统计蓝莓成活率。 　　2 结果与分析 　　2.1 不同ZT浓度对蓝莓诱导培养的影响 　　蓝莓经过诱导培养基培养14d后开始长新芽。不同的ZT浓度蓝莓的诱导情况也不同，从表1可知，随着ZT浓度的增加，蓝莓的诱导率提高，当ZT浓度达到2.0mg/L时，新芽粗壮，诱导率最高，为57.5%，当ZT浓度继代增加时，蓝莓诱导率下降，愈伤组织化。 　　2.2 不同激素浓度组合对蓝莓继代培养的影响 　　由表2可以看出，蓝莓在继代培养基WPM+ ZT1.0+IBA0.2mg/L中增殖倍数最高，苗生长最粗壮，说明IBA在蓝莓增殖过程中起促进作用，但IBA浓度达到0.3mg/L时，蓝莓增殖倍数下降，并开始出现玻璃化现象。（下转第87页） 　　（上接第12页） 　　2.3 不同IBA浓度对蓝莓生根培养的影响 　　蓝莓通过1/2WPM+IBA处理后，在苔藓中进行瓶外生根培养28d后统计蓝莓成活率如表3。由表可见，IBA对蓝莓生根影响显著。当蓝莓通过1/2WPM+IBA 0.2mg/L培养基处理后的瓶外生根培养成活率最高，达到了82.5%，分别比其他两种培养基提高了37.5%和22.2%。 　　3 结论与讨论 　　在不同季节采取蓝莓外植体进行诱导培养时，蓝莓诱导率相近；而蓝莓在诱导培养基改良WPM+ZT 2.0mg/L中新芽生长最好，诱导率最高，达到了57.5%。在改良WPM基本培养基中只添加ZT1.0mg/进行继代培养时，芽矮小，有些呈玻璃化，而继续添加生长素IBA0.2mg/培养，芽明显长高较粗，增殖