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专题二：细胞工程 知识框架：（你学到了什么？） 知识清单： 细胞工程： 操作水平：____细胞水平或细胞器水平___ 目的：按照人的意愿来改造细胞内的___遗传物质_____或获得___细胞产品___ 细胞全能性： 概念：具有某种生物全部的__遗传物质_的任何一个细胞，都有发育成 完整个体__的潜能。注意：细胞全能性需要一定的条件才能表现。 高低比较： 受精卵_＞__生殖细胞(如花粉、精子)_ ＞___体细胞； ②植物体细胞__＞__动物体细胞； ③未分化的细胞__＞__分化程度低的细胞__＞___分化程度高的细胞。 植物细胞工程 植物组织培养与植物体细胞杂交 1、植物组织培养概念： 在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、胚状体（根或芽），最终形成完整的植株。 2、植物体细胞杂交概念： 将不同种植物的体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。 3、植物组织培养与植物体细胞杂交的比较： 名称 植物组织培养 植物体细胞杂交 原理 植物细胞的全能性 细胞膜的流动性和植物细胞的全能性 过 程 离体的植物器官、组织或细胞 脱分化 营养物质和激素 人造胚乳和种皮 愈伤组织 胚状体 人工种子 再分化营养物质、激素、阳光 发 育 根、芽 植物体 植物细胞A、B 去壁 原生质A、B 人工诱导 融合的原生质体 杂种细胞 愈伤组织 杂种植株 注 意 事 项 条件： 离体、无菌； 定的营养物质：水、无机盐、蔗糖、葡萄糖和维生素等； 激素： 主要是生长素和细胞分裂素； ④适宜的温度和光照(培养后期) 2、取材：植物幼嫩的部位或花药 1、去壁方法：用纤维素酶和果胶酶 2、人工诱导原生质体融合的方法： 物理法：离心、振动、电刺激 化学法：聚乙二醇（PEG） 3、原生质体融合的标志：杂种细胞再生出细胞壁 4、脱分化与再分化的比较： 比较内容 脱分化 再分化 过程 细胞 愈伤组织 愈伤组织 完整植株 形成体特点 排列疏松、高度液泡化、无叶绿体的薄壁细胞 有根、芽 需要条件 离体；②适宜的营养；③激素 离体；②适宜的营养； ③激素 ④光照 应用 1、微型繁殖： (1)概念：快速繁育优良品种的植物组织培养技术。 (2)特点：保持优良品种的遗传特性。 (3)意义：高效快速地实现种苗的大量繁殖。 2．作物脱毒 (1)选材：无病毒的根尖或茎尖。 (2)结果：高产优质的脱毒苗。 3．人工种子 (1)特点 ①后代无性状分离。 ②不受气候、季节和地域限制。 (2)结构：人工薄膜＋胚状体或不定芽或顶芽或腋芽。 (3)获得方法：植物组织培养。 4．单倍体育种 (1)方法：花药的离体培养。 (2)优点 ①后代稳定遗传，都是纯合子。 ②明显缩短育种年限。 5．突变体的利用 (1)产生：植物组织培养至愈伤组织时期，该时期的遗传物质易收到外界因素的影响。 (2)利用：筛选对人们有利的突变体进而培育新品种。 6、转基因植物的培育 （1）方法：通过转基因技术得到含有目的基因的植株细胞，再通过植物组织培养为转基因植株。 7、细胞产物的工厂化生产 (1)产物种类：蛋白质、脂肪、糖类、药物、香料、生物碱等。 (2)生产技术：植物组织培养技术培养到愈伤组织时期。 动物细胞工程 (一)动物细胞工程常用的技术： 动物细胞培养、动物细胞融合、单克隆抗体的制备和动物细胞核移植等。其中动物细胞培养是其他动物细胞工程技术的基础。 （二）动物细胞培养 1、原理：动物的细胞培养的理论依据细胞增殖（有丝分裂）。 2、过程： 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 剪碎，胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）酶处理 单个细胞（细胞悬浮液） 原代培养，特点：贴壁生长和接触抑制 10代细胞 传代培养 40—50代细胞 （细胞株，遗传物质未改变） 细胞系(遗传物质改变) 3、培养条件： （1）无菌无毒：通常在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。 （2）营养：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、微量元素、促生长因子和动物血清等天然成分。 （3）适宜的温度和PH：温度为36.5℃-37.5℃，PH=7.2-7.4。 （4）气体环境：CO2和O2，O2是有氧呼吸所必需的，CO2 的主要作用是维持培养