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植物組织培养在花卉上的应用
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植物组织培养在花卉方面的应用
摘要:随着生活水平的提高,人们对花卉的需求日益增加,对花卉质量的要求也越来越高。在我国,大多数的观赏植物均采用常规方法繁殖,如种子繁殖,扦插,嫁接,分株等方法,繁殖系数低,苗木质量差,繁殖周期长,品种推广慢,且受季节和自然发育的限制,严重阻碍了花卉业在我国的迅速发展。由于花卉植物遗传背景复杂,自然界的物种资源又有限,以往传统的播种方法和常规无性繁殖已经很难满足人们的要求。植物组织培养是20世纪发展起来的一项生物技术,经过几十年的发展,这项技术在基础理论和实际应用方面都获得了飞快的发展。植物组织培养培养技术具有独特的优势,能快速繁殖一些优良品种并进行脱毒,可以定向改良花卉的某个目标性性状而不改变其它原有性状,目前能用试管快繁的花卉近200种。本文综述植物组织培养技术在花卉方面的应用概况。
关键字:花卉;组织培养;污染;快繁
花卉组织培养,就是通过无菌操作分离花卉植物体的一部分,如花、茎尖、茎段、叶、幼胚等,并配合一定的营养、生长调节物质,通过严格控制温度、光照这些因素,使其迅速生长,能够缩短其生长周期,获得大量遗传性状一致的幼苗。
1花卉组织培养的方法和步骤:
1.1培养材料的采集
要根据培养目的适当选取材料,选择原则是:易于诱导、带菌少。要选取植物组织内部无菌的材料。这一方面要从健壮的植株上取材料,不要取有伤口的或有病虫的材料。另一方面要在晴天,最好是中午或下午取材料,决不要在雨天、阴天或露水未干时取材料。因为健壮的植株和晴天光合呼吸旺盛的组织,有自身消毒作用,这种组织一般是无菌的。
从理论上讲,越是具有全能性的部位,其组培的成功性就越高,植物具有全能性的细胞通常有三类:一是受精卵;二是发育中的分生组织细胞;三是雌雄配子及单倍体细胞。在观赏花卉组织培养中,外植体材料的最佳选择是不同的,裸子植物:幼苗、芽和韧皮细胞;被子植物:胚、茎尖(茎段)、根、叶等组织或器官,而孢子植物组织的研究相对较少,目前取材多用叶。
1.2培养材料的消毒
从外界或室内选取的植物材料,都不同程度地带有各种微生物。这些污染源一旦带入培养基,便会2造成培养基污染。因此,植物材料必须经严格的表面灭菌处理,再经无菌操作接种到培养基上。
第一步 将采集来的植物材料除去不用的部分,将需要的部分仔细洗干净,主要是放置在自来水龙头下流水冲洗几分钟至数小时,冲洗时间视材料清洁程度而定。
第二步 对材料的消毒灭菌。要在超净台或接种箱内完成,准备好消毒的烧杯、玻璃棒、75%酒精、消毒液、无菌水、计时器等。先用酒精浸泡30s至1min,用无菌水冲洗,然后用消毒液浸泡数分钟(根据消毒液的不同浸泡时间长短不同),用无菌水冲洗数次。
1.3制备外植体
将已消毒的材料,用无菌刀、剪刀、镊子等,在无菌的环境下,剥去芽的鳞片、嫩枝的外皮和种皮胚乳等,叶片则不需要剥皮。在操作中严禁用手触动材料。
1.4接种和培养
第一步 接种:在无菌环境下,将切好的外植体立即接在培养基上,每瓶接种1至2个,以防止交叉污染。
第二步 封口:接种后,瓶、管用封口膜封口,培养皿用封口胶带封口。
第三步 培养:将培养基位于培养室培养,温度大多保持在25℃左右,但要因花卉种类及材料部位的不同而区别对待。
1.5增殖
外植体的增殖是组培的关键阶段,在新梢等形成后为了扩大繁殖系数,需要继代培养。把材料分株或切断转入增殖培养基中,增殖培养基一般在分
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