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母液的配置 一、目的要求 1、通过MS培养基母液，B5培养基母液的配制，掌握配制培养基母液的基本技能； 2、掌握培养基各种母液的保存方法。 二、仪器与用具 1、仪器：各类天平、磁力搅拌器、冰箱； 2、用具：烧杯、量筒、玻璃棒、试剂瓶、标签； 3、试剂：95%酒精，0. 1 -1N NaOH，0.1-1N HCl，配制MS培养基所需的各种无机物、有机物，蒸馏水。 三、方法步骤 （一）母液的配制 母液是欲配制培养基的浓缩液，一般配成比所需浓度高10—100倍。 优点：（1）保证各物质成分的准确性； （2）便于配置时快速移取； （3）便于低温保藏。 1、MS大量元素母液（10×） 称10升量溶解在1升蒸馏水中。配1升培养基取母液100ml。 化学药品 1升量 10升量（10×） 50升量（50×） ① NH4NO3 1650 mg 16.5g ② KNO3 1900 mg 19.0g ③ CaCl2·2H2O （CaCl2） 440 mg （ ） 4.4g ④ MgSO4·7H2O（MgSO4） 370 mg （ ） 3.7g ⑤ KH2PO4 170 mg 1.7g 2、MS微量元素母液（100×） 称10升量溶解在100ml蒸馏水中。配1升培养基取母液10ml。 化学药品 1升量 10升量 100升量（100×） ① MnSO4·4H2O （ MnSO4·H2O） 22.3mg （21.4 mg） 223mg （214 mg） ② ZnSO4·7H2O 8.6 mg 86mg ③ H3BO3 6.2 mg 62 mg ④ KI 0.83 mg 8.3 mg ⑤ Na2MoO4·2H2O 0.25 mg 2.5mg ⑥ CuSO4·5H2O 0.025 mg 0.25mg ⑦ CoCl2·6H2O 0.025mg 0.25mg 注意：CoCl2·6H2O和CuSO4·5H2O可按10倍量（0.25 mg×10=2.5 mg）或100倍量（25 mg）称取后，定容于100ml水中，每次取10ml或1ml，即含0.25 mg的量。 3、MS铁盐母液（100×） 称10升量溶解在100ml蒸馏水中。配1升培养基取母液10ml。 化学药品 1升量 10升量 100升量（100×） Na2·EDTA 37.3 mg 373 mg FeSO4·7H2O 27.8 mg 278 mg 注意配制时，两种成分分别溶解在少量蒸馏水中，其中EDTA盐较难完全溶解，可适当加热。混合时，先取一种置容量瓶（烧杯）中，然后将另一种成分逐加逐次剧烈震荡，至产生深黄色溶液，最后定容，保存在棕色试剂瓶中。 4、MS有机物母液（100×） 称10升量溶解在100ml蒸馏水中。配1升培养基取母液10ml。 化学药品 1升量 10升量 100升量（100×） ① 烟酸 0.5 mg 5mg ② 盐酸吡哆素（VB6） 0.5 mg 5mg ③ 盐酸硫胺素（VB1） 0.1 mg 1 mg ④ 肌醇 100 mg 1 g ⑤ 甘氨酸 2 mg 20mg 将表中配方的量分别乘以2,配成200ml的母液，其中微量元素母液，较难准确称量，可以将其扩大10倍，然后配置成200ml溶液，从中取10ml进行配置,所得浓度不变。 B5培养基 成分 使用浓度(mg/L) 大量元素 硝酸钾　KNO3 2500 CaCl2·2H2O 150 MgSO4·7H2O 250 (NH4)2SO4 134 ? ? ? 微量元素 KI 0.75 H3BO4 3.0 MnSO4·4H2O 10 ZnSO4·7H2O 2.0 Na2MoO4·2H2O 0.25 CoCl2·6H2O 0.025 ? ? ? 铁盐 CuSO4·5H2O 0.025 Na2-EDTA 37.3 FeSO4·7H2O 27.8 有机成分 肌醇 100 烟酸 1.0 盐酸吡哆醇 1.0 盐酸硫铵 10