脫细胞真皮基质在口腔医学领域的应用进展.doc

　　[提要] 脱细胞真皮基质( acellular dermal matrix， ADM) 是近年兴起的新型真皮移植替代材料， 由异体或异种皮经过特殊处理制备而成。由于ADM 去除了皮肤中的全部细胞成分和部分可溶性蛋白， 生物相容性极佳， 目前在皮肤烧伤治疗、腹壁缺损修补、硬脑膜修复、软硬组织充填和美容整形方面得到广泛应用。作者着重对ADM 在口腔医学领域的应用进展进行综述， 同时也对其制备和生物学特性作了简单介绍。 　　[关键词] 脱细胞真皮基质; 缺损修复; 组织充填; 口腔医学 　　脱细胞真皮基质(acellular dermal matrix， ADM)的研究最初集中在烧伤领域。对于烧伤引起的皮肤缺损，临床上主要采用自体全厚或中厚皮片进行修复，虽然受区修复效果较好，但缺点也非常突出： 一是供区损伤严重，术后瘢痕明显;二是供区组织量有限，修复大面积缺损有一定困难。采用刃厚皮片可以在一定程度上缓解组织供给量问题，但由于缺少真皮支持，皮片成活后受区容易形成瘢痕，影响外形和功能，特别是在颜面和关节部位。因此，寻求组织供应充足、能保证真皮厚度的异体材料，成为当时的研究热点。有证据显示，异体皮肤移植免疫反应主要作用于皮肤的细胞成分[1]。在哺乳动物真皮中， 由于缺少表达组织相容性抗原的主要细胞，免疫原性极低[2]。1985 年， Heck 等[3]首先采用异体真皮作为自体表皮载体进行烧伤治疗，获得成功。但未经处理的异体真皮仍然含有成纤维细胞、微血管内皮细胞、皮肤附件细胞等低抗原成分，生物相容性仍有待改善。1993年，Compton 等[4]成功制造出无细胞异体真皮基质并应用于临床， 使得异体皮移植成功率得到了质的提高。其后，ADM 的临床应用普遍开展， 并由单纯的烧伤治疗延伸到腹壁缺损修补、硬脑膜修补、软硬组织充填等多个领域[5～7]。由于口腔黏膜与皮肤结构和功能相似，近年来，ADM 在口腔黏膜缺损修复中也得到了广泛应用， 并迅速拓展到口腔医学各个学科。本文着重对ADM 在口腔医学的应用进行综述， 同时也对ADM 的制备和生物学特性进行介绍。 　　1 ADM 的制备和种类制备ADM 的关键是尽可能去除皮肤的细胞成分， 保留真皮内的细胞外基质， 维持完整的胶原形态和基底膜结构。ADM 的制备方法很多， 最常用的是Dispase- Triton 法和 NaCl- SDS 法。前者先用 Dispase或胰蛋白酶消化皮片， 再用Triton- 100 洗涤， 去除组织内的细胞和抗原成分[2]。后者先以高渗NaCl 去除表皮， 再用SDS 液洗脱细胞[8]。只要控制得当， 两者均能达到彻底脱细胞的目的， 但有报道[9]认为， 后者基质中残留了较多的抗原成分。除上述方法外， 其他方法还有低浓度胰蛋白酶法、反复冻溶法、NaOH 消蚀法和平衡盐孵育法[10， 11]。根据供体来源， 临床应用的ADM 可分为异体ADM 和异种 ADM。前者来源于人体皮肤， 后者主要由猪皮制备。根据ADM 外形， 可分为片状 ADM 和微粒型ADM。微粒型又称可注射型， 多用于凹陷畸形的微创充填。根据制备后胶原分子的化学结构， 又可分为交联型和非交联型。修复上皮缺损时， 通常选择非交联型， 移植后吸收改建快。若进行组织充填， 则可选择交联型， 移植后胶原改建慢， 外形更稳定[12]。 　　2 ADM 的生物学特性 　　2.1 ADM 的成分ADM 去除了表皮细胞和真皮中的成纤维细胞、微血管内皮细胞、皮肤附件细胞、朗格汉斯细胞及部分可溶性蛋白， 仅保留细胞外基质和相对完整的基底膜[9]， 因此主要由纤维性结构构成， 基本成分包括Ⅰ型 胶 原 、Ⅲ型 胶原 、Ⅳ型 胶 原 、Ⅶ型 胶 原 、弹 性 蛋白、层粘蛋白、硫酸角质素和纤维连接素等[8， 9]。制备方 法 不 同 ，ADM 的 基 质 成分 略 有 差 异 ， Dispase -Triton 法制备的 ADM 中， Ⅶ型胶原和纤维连接素几近消失[9]。采用NaOH 消蚀法， 胶原保存完好， 但基底膜破坏严重[10]。基质成分的差异对ADM 移植后的生物学行为会产生一定影响。 　　2.2 ADM 的生物相容性如前所述， 皮肤移植的免疫反应主要作用于表皮细胞、真皮中的内皮细胞及成纤维细胞，细胞外基质和胶原的免疫原性极低。ADM 清除了皮肤中的上皮成分， 具有良好的生物相容性， 因此可在体内长期存留。大量研究证实， 异体ADM 移植不存在临床可见的排斥反应， 也未检测到明确的组织器官毒性和细胞毒性[13]。但种属来源不同，ADM 移植后的局部反应也存在差异。一般认为， 异种ADM 不会引起急性排斥反应， 是否存在慢性排斥则有争议。多数作者临床应用异种ADM 时， 没有观察到明显的排斥反应。但组织学研究发现， 大鼠体内移