哺乳动物胞表达重组蛋白.ppt

哺乳动物细胞培养制备重组蛋白质药物 按照宿主细胞的类型，可将基因表达系统分为: 发展历史和现状 1987年FDA批准了基因泰克公司生产的组织型纤溶酶原激活剂（tPA） ， 世界上第一个哺乳动物细胞制备的重组蛋白质药物 标志着哺乳动物细胞制备重组蛋门时代的到来。 经过20多年的发展，哺乳动物细胞制备重组蛋白技术发生了巨大的变化。主要表现在 哺乳动物细胞大规模生产重组蛋白的关键之处 表达载体 改进表达载体，提高表达水平和产量 分泌表达 下游纯化 宿主细胞 新型细胞株的建立 培养工艺 一、 真核表达载体 真核表达载体-启动子 外源基因在哺乳动物细胞中的表达与多种因素有关，主要是启动子和增强子的强弱以及它们之间的搭配。 人巨细胞病毒的早期基因启动子和增加子( promoter／enhancer)是最常用的启动子。 高效启动子的发现和改构 内含子 某些内含子有重要的基因功能调控序列,目的基因以基因组形式克隆入载体能得到高表达。 为增加转录产物的稳定性,表达载体中一般含有天然的或人工合成的内含子序列。 二、宿主细胞 哺乳动物细胞大规模培养生产重组蛋白中， 常用的细胞系有 中国仓鼠卵巢细胞（CHO）