第三章 中药制剂的理化鉴别技术.ppt

二、仪器与试剂 紫外光灯、滤纸、回流装置、锥形瓶、烧杯、水浴锅 三、操作方法 取制剂的提取液点在滤纸上或加入蒸发皿中，置紫外光灯下观察所产生的荧光。必要时可在供试品中加酸、碱或其他试剂，再观察荧光及其变化。 UV 四.注意事项 荧光强度较弱，故一般需在暗室中观察荧光； 供试液一般用毛细管吸取，少量多次点在滤纸上，使斑点集中且具有一定浓度； 紫外光对人的眼睛和皮肤有损伤，操作者应避免与紫外光较长时间接触； 试验时，一般将供试品置于紫外光灯下约10cm处观察所产生的荧光。紫外光波长一般为365nm，如用254~265nm波长观察荧光，应加以说明。 二、方法 （三）荧光鉴别法 4.实例——复方鸡血藤膏 【处方】滇鸡血藤膏粉、川牛膝、续断、红花、黑豆、糯米、饴糖。 【鉴别方法】取本品粉末1g，加水l0ml，加热10分钟，滤过，滤液置紫外光灯（365nm）下观察，显淡蓝色荧光。 一、概述 （一）原理 使用本法鉴别中药制剂，通常在同一块薄层板上点加供试品和对照品，在相同条件下展开，显色检出色谱斑点后，将所得供试品与对照品的色谱图进行对比分析，从而对药品进行定性鉴别。 （二）固定相 选择合适的吸附剂是吸附色谱法成功的关键。 良好的吸附剂应具备： ①不与样品及流动相发生化学反应 ②不溶于流动相 ③具有较大的表面积和一定的吸附能力。 ④具有一定的细度，颗粒要均匀。 极性吸附剂：氧化铝、硅胶、聚酰胺、硅藻土、硅酸镁 非极性吸附剂：活性炭 1.氧化铝 ①是一种吸附力很强的极性吸附剂。 ②含水量越高，吸附能力越弱。 ③根据含水量的多少，分为I~V级。 可通过活化或者去活化得到不同活度级别的氧化铝。通常在400℃左右加热6小时，可得I~II级氧化铝 2.硅胶 ①吸附力比氧化铝弱。 ②吸附能力与游离硅醇基的数量和含水量有关。 ③含水量17%则失去吸附能力，不可做吸附剂。 硅胶的活化： 将含水硅胶在100~110℃温度下加热30min。 温度超过500℃硅胶将失去活性。 市售硅胶 硅胶G（加入粘合剂煅石膏14%~22% 硅胶F（加入了紫外光下能产生荧光的物质） 硅胶H（不含粘合剂） 硅胶GF（含粘合剂和荧光物质） 硅胶HF（不含粘合剂，含有荧光物质） 硅胶S（含淀粉） （三）流动相 ①由一种或几种溶剂混合组成。 ②解吸附：把物质从固定相上洗脱下来。 常用的流动相极性顺序： 水甲醇乙醇丙酮正丁醇乙酸乙酯三氯甲烷乙醚苯四氯化碳环己烷石油醚 选择原则：相似相溶 极性 大 小 水 亲水性有机溶剂 甲醇乙醇丙酮 亲脂性有机溶剂 弱亲脂性有机溶剂： 正丁醇乙酸乙酯 强亲脂性有机溶剂： 三氯甲烷乙醚苯石油醚 （三）溶剂（流动相） 流动相的选择： 四、操作步骤 1.仪器与材料 薄层板及固定相 涂布器 点样器 展开箱 显色与检测仪器 （1） 薄层板 具有一定机械强度、化学惰性、耐一定温度、表面平整、厚度均匀，价格合理，常用为玻璃板。 玻璃板的常用规格：5cm ×20cm、10cm×20cm、20cm×20cm，要求光滑、平整、洗净后不附水珠、干燥。 （2） 固定相 硅胶：常用极性吸附剂，具表面活性中心，略带酸性； 氧化铝：常用极性吸附剂，具表面活性中心，略带碱性； 硅藻土：中性吸附剂； 纤维素：液-液分配色谱担体（水为固定液），具一定粘性； 聚酰胺：特殊有机薄层材料。 硅胶G(含粘合剂煅石膏)，GF254(含254nm荧光剂)，硅胶H(不含粘合剂)，硅胶HF254 （3）涂布器 有手工、半自动、全自动薄层涂布器 （4）点样器材 常用微升毛细管或手动、半自动、全自动点样器 微升毛细管 全自动点样器 手动点样器 （5）展开箱 上行展开可用适合薄层板大小的专用平底或双槽展开缸，展开时须能密闭； 水平展开用专用的水平展开缸。 类别 特点或组间区别 组内区别 黄酮和黄酮醇 2-苯基色原酮 3-OH （C2-C3双键） 二氢黄酮和 2-苯基色原酮 3-OH 二氢黄酮醇 （C2-C3单键） 异黄酮和二氢异黄酮 3-苯基色原酮 C2-C3双键和单键 查耳酮和二氢查耳酮 C环开环 3碳链为双键和单键 橙酮 C环为五元环 花色素和黄烷醇 无4位羰基 离子和分子