高级生物化学蛋白质2.ppt

聚丙烯酰胺凝胶电泳 SDS原理：该法是依据混合蛋白的分子量不同来进行分离的 。SDS是一种去垢剂，可与蛋白质的疏水部分相结合，破坏其折叠结构，并使其广泛存在于一个广泛均一的溶液中。SDS蛋白质复合物的长度与其分子量成正比。在样品介质和凝胶中加入强还原剂和去污剂后，电荷因素可被忽略。蛋白亚基的迁移率取决于亚基分子量 。 。 聚丙烯酰胺凝胶电泳 PAGE根据其有无浓缩效应，分为连续系统和不连续系统两大类。 连续系统电泳体系中缓冲液pH值及凝胶浓度相同，带电颗粒在电场作用下，主要靠电荷不同和分子筛效应进行分离。 不连续系统中由于缓冲液离子成分，pH，凝胶浓度及电位梯度的不连续性，带电颗粒在电场中泳动不仅有电荷效应，分子筛效应，还具有浓缩效应，因而其分离条带清晰度及分辨率均比前者更佳。 不连续系统聚丙烯酰胺凝胶电泳 浓缩效应： 聚丙烯酰胺凝胶电泳示意图 1. 某蛋白质溶液分别用SDS和阳离子交换柱层析进行分析，得到如图所示的结果。关于该溶液中蛋白质的组成，你的结论是什么？ 思 考 题 阳离子交换柱层析进行分析 SDS. 比较说明SDS(SDS-聚丙烯酰胺电泳)和琼脂糖凝胶电泳的物质 浙江大学2004 2、等电聚焦电泳： 在电泳支持介质中加入载体两性电解质通以直流电后