生命的化学基础33663课件.pptVIP

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  • 2016-11-27 发布于河南
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(二)复性 核酸的理化性质 变性DNA在适当的条件下,两条彼此分开的单链可以重新缔合成为双螺旋结构,这一过程称为复性。 影响DNA复性的因素 降温速率,负效应(热变性的DNA在缓慢冷却的条件下可以复性,称为退火-annealing) (三) 分子杂交(hybridization) 核酸的理化性质 在变性的DNA溶液中加入外源DNA单链分子或RNA单链分子(与原DNA具有序列互补性),去掉变性条件后复性形成双螺旋结构的过程。 核酸的理化性质 分子杂交的种类 Southern Blotting:检测DNA Northern Blotting:检测RNA 核酸的研究方法 核酸的分离纯化和定量测定 核酸的离心分析 核酸的凝胶电泳 核酸的测序 PCR DNA的化学合成 核酸的研究方法 核酸的分离纯化 要点: 利用各种核酸的特性选择合适的纯化方法(注意掌握原理); 抑制核酸酶的作用,防止核酸的降解和变性。 核酸的研究方法 核酸含量的测定 紫外分光光度法 核酸的研究方法 A260=1 50 ?g/ml 双螺旋DNA 20 ?g/ml 寡核苷酸 40 ?g/ml 单链DNA/RNA 核酸的凝胶电泳 琼脂糖凝胶电泳分离核酸 并测定DNA分子量 核酸的研究方法 核酸测序 核酸的研究方法 双脱氧终止法测定DNA序列 DNA聚合酶链反应(PCR) PCR:体外扩增DNA的技术 核酸的研

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