第二章第三节培养基组成类型及配制与灭菌20130305.pptVIP

3、抑制酚类物质形成的物质： （1）抗坏血酸： 可以加入培养基或浸泡处理外植体。 （2）聚乙烯吡咯烷酮（PVP）： 加入培养基中。 4、生长抑制剂： 常用矮壮素、比久（B9）、多效唑（pp333） 、三碘苯甲酸、根皮酚等。 二、培养基的类型： 1、高盐浓度培养基：MS、B5、SH等。 适用于多数营养需求量较大的植物。 2、中等盐浓度培养基：Nitsh、Miller等 大量元素浓度约为MS的1/2。 3、低盐培养基：WPM、 White等。 大量元素浓度约为MS的1/4左右。 适用于木本植物的培养。 表1　MS培养基的组成配方 组成成分 数量(mg/l) 组成成分 数量(mg/l) NH4NO3 1650 Na2-EDTA 37.3 KNO3 1900 FeSO4·7H2O 27.8 CaCl2·2H2O 440 CuSO4·5H2O 0.025 MgSO4·7H2O 370 蔗糖 30 KH2PO4 170 pH 5.8 KI 0.83 肌醇 100.0 H3BO3 6.2 烟酸 0.5 MnSO4·4H2O 22.3 盐酸吡哆醇 0.5 ZnSO4·7H2O 8.6 甘氨酸 2.0 Na2MoO4·2H2O 0.25 盐酸硫铵等 0.4 CoCl2·6H2O 0.025 表2　B5培养基的组成和配方 组成成分 数量(mg/l） 组成成分 数量(mg/l) KNO3 2500 FeSO4·7H2O 27.8 CaCl2·2H2O 150 CuSO4·5H2O 0.025 MgSO4·7H2O 250 蔗糖 40 (NH4)2SO4 134 pH 5.5 KI 0.75 肌醇 100 H3BO4 3.0 烟酸 1.0 MnSO4·4H2O 10 盐酸吡哆醇 1.0 ZnSO4·7H2O 2.0 激动素 0.1 Na2MoO4·2H2O 0.25 2,4－D 0.1－1.0 CoCl2·6H2O 0.025 盐酸硫铵 10 Na2-EDTA 37.3 　　　　　　　 　 　　表3 N6培养基的组成和配方 组成成分 数量(mg/l) 组成成分 (mg/l) KNO3 2.3 Na2－EDTA 37.3 CaCl2·2H2O 166 FeSO4·7H2O 27.8 MgSO4·7H2O 185 蔗糖 50 KH2PO4 400 pH 5.8 (NH4)2SO4 463 烟酸 0.5 KI 0.8 盐酸吡哆醇 0.5 H3BO3 1.6 甘氨酸 2.0 MnSO4·4H2O 4.4 盐酸硫铵 1.0 ZnSO4·7H2O 1.5 三、培养基母液及激素母液的配制： 由于培养基中元素种类多，用量少，因此每次称量繁琐，因此通常将各种营养成分配制成母液保存，配制培养基时根据需要量取用，从而简化操作，节省时间。 营养元素母液根据其性质和反应特性混合。 激素母液 根据使用浓度配制。 1、器皿和用具的准备 仪器包括万分之一天平，百分之一天平，pH计 用品包括不同型号的烧杯（2000ml、1000ml、100ml），容量瓶（1000ml、500ml、100ml）、移液管（10ml、5ml、2ml、1ml）、试剂瓶若干（1000ml、250ml）、移液器（1000ul、200ul）滴灌、玻璃棒、试管、各种规格三角瓶（150ml、100ml、50ml）、培养基分装器，漏斗、称量纸、标签纸、不同范围pH试纸、铅笔等。 玻璃器皿用前清洗干净。 2、药品及蒸馏水准备： 药品采用分析纯或化学纯试剂。 水利用蒸馏水或去离子水。 * 第二节 培养基的组成、配制与灭菌 一、培养基的组成和作用 培养基（medium）是植物组织培养的重要材料，是外植体生长的营养物质，只有配制出适宜的培养基，才能使组织培养获得成功。 通常植物组织培养所用培养基包括以下六大类成分，即矿质营养、有机成分、植物生长调节剂、碳源、琼脂以及其他附加物等。 培养基的主要指标是营养成分及植物生长调节物质的浓度。 （一）矿质营养： 矿质营养又称无机营养，是指植物生长发育所需要的各种化学元素。