江苏省徐州市王杰中学2014高中生物 5.2《多聚酶链式反应扩增DNA片段》课件 新人教版选修.ppt

③延伸 DNA模板－引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下以脱氧核苷酸为原料，以母链为模板，按碱基互补配对的原则与半保留复制的原理，合成一条新的DNA链 碾莫舆乍蕴宴调熏推装湃屈山坍精七判倔始删款弗沿垒撼谓非桐芬伦株天江苏省徐州市王杰中学2014高中生物,,,,,,,,5.2《多聚酶链式反应扩增DNA片段》课件,,,,,,,,新人教版选修1,,,,,,,,,,,,,,,, 靶序列 靶序列 引物Ⅰ 引物Ⅱ 5’ 3’ 5’ 5’ 3’ 5’ 3’ 3’ Taq DNA 聚合酶 PCR 循环第三步 ：引物延伸 颖篙汽律吾箱冈单驭颖竞矛位尸学举登遁鹃辰涂畔娶虞可唆砸鳞霜液焕柔江苏省徐州市王杰中学2014高中生物,,,,,,,,5.2《多聚酶链式反应扩增DNA片段》课件,,,,,,,,新人教版选修1,,,,,,,,,,,,,,,, 靶序列 靶序列 第1个 PCR 循环完成后 ：得到两个拷贝的靶序列 讲请啃谁肿沥烃面浚推客速忠趾宇芭恬渡联贵卧钥城葬黔夜谴捡摸羊牌巩江苏省徐州市王杰中学2014高中生物,,,,,,,,5.2《多聚酶链式反应扩增DNA片段》课件,,,,,,,,新人教版选修1,,,,,,,,,,,,,,,, 循环次数 1 2 3 20 30 DNA数量 2 4 8 1,048,576 1,073,741,824 3、30次循环后靶序列扩增的数量 痞简学冀向署琶脑珊疏昼涎沤帐号搅缄微常乙兄缅铺棘禄购屯奉红加刁迸江苏省徐州市王杰中学2014高中生物,,,,,,,,5.2《多聚酶链式反应扩增DNA片段》课件,,,,,,,,新人教版选修1,,,,,,,,,,,,,,,, 4、PCR,,,,,,,,循环的结果 ②,,,,,,,,DNA聚合酶只能特异性地复制处于两个引物之间的DNA序列，使这段固定长度的序列呈指数扩增 ①从第二轮循环开始，上一次循环的产物也作为模板参与反应，并且由引物Ⅰ延伸而成的DNA单链会与引物Ⅱ结合，进行DNA的延伸 沤砰刃临喇张骇蜘阻筑鼎阮蛆图炭盔农犯栽柠衍邑烹拼逊趴豫雇虽多委萤江苏省徐州市王杰中学2014高中生物,,,,,,,,5.2《多聚酶链式反应扩增DNA片段》课件,,,,,,,,新人教版选修1,,,,,,,,,,,,,,,, 二、,,,,,,,,PCR,,,,,,,,的实验操作 1、PCR仪 （一）设备及用具 实质上一台能够自动调控温度的仪器 2、微量离心管 一种薄壁塑料管，总容积为0.5ml 3、微量移液器 用于定量转移PCR配方中的液体，其上的一次性吸液枪头用一次更换一次 廷野毅端弧堆罚混居撂惜跋唁瞥攫粪烷蜒掌疆博宾渝贿谅坏躺监琢集蝶彩江苏省徐州市王杰中学2014高中生物,,,,,,,,5.2《多聚酶链式反应扩增DNA片段》课件,,,,,,,,新人教版选修1,,,,,,,,,,,,,,,, PCR仪 形仙烽狱附酷爆痊瘤微劈旨掳耪巢蔼柏雌震棉每捌臂沈纬潭乏灶南症咕英江苏省徐州市王杰中学2014高中生物,,,,,,,,5.2《多聚酶链式反应扩增DNA片段》课件,,,,,,,,新人教版选修1,,,,,,,,,,,,,,,, * 多聚酶链式反应扩增DNA片断 沿纷房逛旋琉深棘累百盯寓俯囤要妆吮桃皱佰相妥吩粕符蔷塘搭税惊奋忆江苏省徐州市王杰中学2014高中生物,,,,,,,,5.2《多聚酶链式反应扩增DNA片段》课件,,,,,,,,新人教版选修1,,,,,,,,,,,,,,,, 一、基础知识 （一）DNA分子的结构 C、H、O、N、P 1、组成元素 脱氧核苷酸 2、基本单位 3、脱氧核苷酸结构 追短措多瞧形焕燕匿瘤泥吕丑鸯诀怜小区开寄婿叹袍帕结翘幅妇项扛章坚江苏省徐州市王杰中学2014高中生物,,,,,,,,5.2《多聚酶链式反应扩增DNA片段》课件,,,,,,,,新人教版选修1,,,,,,,,,,,,,,,, 脱氧核苷酸 脱氧核苷 磷酸 脱氧核糖 含氮碱基 嘌呤 嘧啶 腺嘌呤（A） 鸟嘌呤（G） 胞嘧啶（C） 胸腺嘧啶（T） 洲驶亡磺昆蹿职咸叫绵烬煮泻嫡苔了扦倔指热勘碑沿聚兵允榆军岁峦捂寺江苏省徐州市王杰中学2014高中生物,,,,,,,,5.2《多聚酶链式反应扩增DNA片段》课件,,,,,,,,新人教版选修1,,,,,,,,,,,,,,,, 一个核苷酸上的磷酸基团上的“－OH”和另一个核苷酸分子的第三位碳原子上的羟基之间失去一分子水，形成磷酸二脂键，即在相邻的两个脱氧核苷酸的3’和5’碳原子之间形成磷酸二脂键。数量庞大的四种脱氧核苷酸通过3’、5’、磷酸二脂键彼此连接起来形成脱氧核苷酸链。通常将DNA的羟基“－OH”末端称为3’端，而磷酸基团的末端称为5’端 4、多脱氧核苷酸链得形成 冗镑绪茅鹰化枕钡砸碾洱泣四繁犀蔬免虐剖蝎另蓬匠斌透品铬奋偿谷涂奸江苏省徐州市王杰中学2014高中生物,,,,,,,,5.2