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- 2016-11-30 发布于广东
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专题2 微生物的培养与应用一、微生物的实验室培养1.培养基及其配制(1)培养基的概念:人们按照微生物对_________的不同需求,配制出供其生长繁殖的____________。营养物质营养基质(2)培养基的成分:一般都含有水、______(提供碳元素的物质)、_____(提供氮元素的物质)和无机盐。还需要满足微生物生长对____、特殊营养物质以及_______的要求。氮源碳源pH氧气2.无菌技术措施? 3.实验操作? 4.菌种保藏?即时训练1科学家发现家蝇体内存在一种抗菌活性蛋白。这种蛋白质具有极强的抗菌能力,因而受到了研究者的重视。(1)可用金黄色葡萄球菌来检验该蛋白的抗菌特性。抗菌实验所用培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为细菌生长提供?和?。(2)分别在加入和未加入该抗菌蛋白的培养基中接种等量菌液。培养一定时间后,比较两种培养基中菌落的?,确定该蛋白质的抗菌效果。(3)细菌培养常用的接种方法有?和?。实验结束后,对使用过的培养基应进行?处理。答案:(1)碳源 氮源????(2)数量????(3)平板划线法 稀释涂布平板法灭菌解析:实验室常用的培养细菌的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法。平板划线法操作简单方便,但是单菌落不容易分离;稀释涂布平板法操作复杂,但单菌落容易分离。特别要注意微生物的实验室培养本着“无菌操作”的理念,包括实验结束后对使用过的培养基应进行灭菌处理,以避免造成污染。二、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数?即时训练2自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯,然后进行数量的测定。下面是对大肠杆菌进行数量测定的实验,请回答有关问题。步骤如下:①制备稀释倍数为102,103,104,105,106的系列稀释液。②为了得到更加准确的结果,应选用?法接种样品。③适宜温度下培养。结果分析:(1)测定的大肠杆菌数,在对应稀释倍数为106的培养基中,得到以下几种统计结果,与事实更加接近的是?。A.一个平板,统计的菌落数是23B.两个平板,统计的菌落数是22和26,取平均值24C.三个平板,统计的菌落数分别是21,5和52,取平均值26D.四个平板,统计的菌落数分别是21,30,24和25,取平均值25(2)一同学在稀释倍数为106的培养基上测得平板上菌落数的平均值为23.4,那么每升样品中的菌落数是(涂布平板时所用的稀释液体积为0.2 mL)?。(3)用这种方法测定密度,实际活菌数量要比测得的数量?(多、少),因为?。答案:步骤②:稀释涂布平板????(1)D????(2)1.17×108 (3)多 当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察的是一个菌落解析:若对大肠杆菌进行计数,则需要用稀释涂布平板法接种样品。(1)应选取多个菌落数相差不大的平板计数,取其平均值。(2)23.4÷0.2×106=1.17×108。(3)因为菌落可能由1个或多个细菌连在一起生长而成,所以实际活菌数量要比测得的数量多。三、分解纤维素的微生物的分离——纤维素分解菌的筛选?即时训练3有些微生物能合成纤维素酶,通过对这些微生物的研究和作用,使人们能够利用秸秆等废弃物生产酒精,用纤维素酶处理服装面料等。研究人员用化合物A、硝酸盐、磷酸盐以及微量元素配制的培养基,成功地筛选到能产生纤维素酶的微生物。分析回答问题。(1)培养基中加入的化合物A是?,为微生物的生长提供?,这种培养基属于?培养基。(2)为了筛选出能产生纤维素酶的微生物,向培养基中加入?。(3)在筛选出能产生纤维素酶的微生物之前,可用液体培养基培养,增加微生物的浓度。为获得纯净的菌株,常采用平板划线的方法进行接种,此过程所用的接种工具是?,操作时采用?灭菌的方法;还可用?的方法接种。(4)实验结束后,使用过的培养基应该进行灭菌处理后才能倒掉,这样做的目的是?。答案:(1)纤维素 碳源 选择????(2)刚果红????(3)接种环 灼烧 稀释涂布平板????(4)防止造成环境污染解析:(1)纤维素酶能将纤维素水解成葡萄糖,为微生物的生长提供营养,同样,也可以为人类所利用。要筛选到能产生纤维素酶的微生物,应用选择培养基,在培养基中加入纤维作唯一的碳源,能在此培养基中存活的微生物就是能产生纤维素酶的微生物。(2)刚果红可以和像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物,而不与水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。纤维素分解菌能产生纤维素酶分解纤维素,从而使菌落周围形成透明圈。(3)获得纯净的菌株有两种方法,即平板划线法和稀释涂布平板法。平板划线操作时所用的接种环,每次接种之前都要灼烧,这是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物。划线结束后灼烧接种环,能及时杀死接种环上残留的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者。(4)实验结束后,使用过的培养基应该进行灭菌处理后才能倒掉,这样可防
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