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凝血酶原时间（PT）测定 （分析仪器法） 某某人民医院 检验科临检室 凝血酶原时间（PT）测定 （分析仪器法） 编号: 版本:1 页数:共5页 实验原理：凝固法 确定量的血浆（50微升）样本经一定时间加温后，加入PT试剂，采用波长660nm的光照射样本，凝血过程中血浆的混浊度可以通过测量散射光光强度的改变来测定，然后通过标准曲线求出凝血酶原时间，再通过参数计算得出凝血酶原活动度及INR值。 标本采集 2.1 早晨空腹采血(空腹12小时左右),静脉采血。 2.2 3.8％(w/v)枸椽酸钠0.2ml+静脉血1.8ml,混匀。 标本存放 1小时内(3000r/min×15min)分离血浆,室温放置不超过2小时,2～8℃保存不超过4小时，长时间保存需在冰冻条件下，（-70℃不超过6个月）”变为“Ready”,表示仪器预热完成,进入系统准备工作状态,可进行测定。 8.3 输入工作清单: 从主菜单选Work List→出现第一架样本工作清单输入画面,选ID NO Entry输入第一个样本号→按相应实验项目名称键PT,并同时输入此标本的其他测试项目,若选“凝血四项（PT、APTT、Fbg、TT）”，可按Profile #1组合选项选择，选中项目相应位置标记为“○”，选完项目后按ENTER确认，要删除某项目时只需按该项目（按键如PT○变为PT-）即可，→用↑↓键，同样输入其他标本编号项目。（快速输入可用Repeat键，输入重复标本数，复制同样项目的输入。 8.4 放置样本 按8.3所设好的工作清单顺序将离心分离好的样本放置于样本架上,并按顺序把样本架排列于Sampler进样器右边位置(最多同时放5架共50个样本) 8.5 按Start键开始测定. 盖好遮光盖,确认仪器为准备状态(显示屏正上方显示“Ready”)按Start键,进样开始,→测定进行,仪器显示为“Analying”(被选择项目背景变为“◎”，此时可重复8.3,8.4,继续输入其他架样本工作清单,按Rigester,继续确认测试任务,添加样本架继续测试,→测定完成,测定项目背景变为“●”，打印机打印出测定结果，所有测定清单完成，系统恢复“Ready”状态。 8.6 每日维护:完成每日的测定后,关机前维护。 8.6.1 冲冼针Rinse Probe 8.6.2 清空废液瓶,和已使用过的反应杯。 8.6.3 将试剂架连用试剂放入冰箱。 8.7 关机:先关主机,再关打印机。 9．检验结果的判断与分析: 9.1 仪器测定PT的线性范围在5-600秒,测定完成后仪器显示PT秒数、PT活动度、INR值等参数。若不能对参数进行正确计算,将出现下列信息: ﹡﹡﹡.﹡出现错误,不能得到分析数据 ˉˉˉ.ˉ不能计算参数 ＋＋＋.＋数值超出线性范围. 9.2 仪器设定PT参考范围在10-14秒,如果得不到一个正常数值,在数据的左侧将出现下列标记: ﹡ 出现错误信息 数据低于可报告的低限 数据高于可报告的高限 10. 质量控制:每批样本同时测定两个浓度水平(高值和正常值)的质控品,以2S为警告限,3S为失控限,绘制质控图,判断是否在控。质控规则详见室内质控作业指导书。 11 临床意义：PT是用于筛查外源性凝血系统（Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ）及口服抗凝药物剂量（如华发令、双香豆素等）的检测项目。 11.1参考范围：秒数S：10-14 S（患者结果超过正常对照35以上有临床意义） 活动度：80-120％ 国际标准化比值INR：0.8-1.5 11.2 PT延长见于先天性凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ缺乏；低（无）纤维蛋白原血 症；获得性见于DIC、原发性纤溶症、维生素K缺乏、肝病、血循环中有抗凝物质（如口服抗凝剂、肝素）。 11.3 PT缩短：见于先天性凝血因子V增多、口服避孕药、高凝状态（DIC早期、急性心肌硬塞等）、血栓性疾病（脑血栓形成、急性血栓性静脉炎）、多发性骨髓瘤、洋地黄中毒、乙醚麻醉后。 11.4 监测口服抗凝药（如华发令、双香豆素等）的重要指标。 一般要求：PT(S)：18-24 S INR：2.5-3.5，不同疾病不同值。 变异的潜在来源 抗凝剂：草酸盐、EDTA、肝素不适用于PT检查 标本采集处理不当,如血与抗凝剂未充分混匀，出现凝块，混匀时过分用力，使标本溶血，造成结果变异。 纤溶药物的影响，如双香豆素、链激酶、尿酶等。 超剂量使用肝素使凝固时间延长。 FDP增加使凝固时间延长。 某些药物，如口服避孕药、雌激素、天门冬酰胺酶、钠络酮等影响测试结果。 13. 操作注意事项:干粉试剂及质控血浆溶解 13.1 确认溶剂类型，一般溶解液包括：蒸馏水、生理盐水、缓冲液、厂家特定 溶解液，必须按说明书要求使用。 13.2 溶解时，