第五章蛋白质的翻译.pptVIP

第五章 蛋白质的翻译 主要内容 一、蛋白质合成的装备 mRNA, tRNA, 核糖体以及rRNA 二、遗传密码及其兼并 三、蛋白质的翻译(****) 翻译：以mRNA为模板，在核糖体上由tRNA解读，将贮存于mRNA中的密码序列转变为氨基酸序列，合成多肽链的过程。 多种酶和辅助因子参与该过程 5.1 蛋白质合成的装备 5.1.1 mRNA的结构和功能 mRNA 概念的提出 mRNA 两个特征 一段可翻译的密码序列（开放阅读框） 一个核糖体结合位点(ribosome binding site, RBS) 起始密码子开始、以终止密码子结束的一段由连续的核苷酸序列构成的开放阅读框(open reading frame,ORF)。ORF内的核苷酸序列直接决定翻译出来的多肽链的氨基酸序列。 原核生物以及真核生物的RBS位点 在真核生物中，通过Kozak 等的实验表明：在起始密码子附近为下述序列 ： CCRCCAUGG where R is a purine(A and G), and the initiation codon is underlined。 5’的帽子结构以及3’端poly(A)均能增加翻译的效率。 原核生物与真核生物翻译主要不同点： 真核生物的mRNA为单顺反子，原核生物的mRNA为多顺反子（图5-2）。 原核生物的翻译与转录同时进行， mRNA寿命比较短；真核生物转录与翻译在细胞的不同部位， mRNA寿命相对比较长。 原核生物mRNA和真核生物mRNA结构的比较 5.1.2 tRNA 的结构与功能 tRNA的功能 ①运输的工具，运载aa; ②解读mRNA的遗传信息。 同工受体tRNA （Isoacceptor tRNAs ） 携带同一种氨基酸的几种不同tRNA分子 Different tRNAs carrying the same aa tRNAAla的一级结构、二级结构和三级结构 比较所有tRNA，其特点如下 长度从74~94 nt 均含有多个修饰碱基 具有相似的二级和三级结构 5.1.3 rRNA 与核糖体的结构与功能 （1）核糖体的特点 A、一个细胞中有多个核糖体 B、翻译时，一条mRNA上可能结合多个核糖体，形成多聚核糖体的结构（从mRNA 到蛋白质翻译过程中的信号放大） C、核糖体是由多种蛋白质和rRNA组成的核糖核蛋白（RNP）。 D、真核和原核生物的核糖体由均大小两个亚基组成，其不同的是组成的蛋白种类和RNA种类有区别 核糖体的结构和化学组成 16S rRNA的结构 30S 亚基的三维结构 核糖体的三维结构模型和主要的功能部位 核糖体的主要功能部位 A部位 ，A (acceptor) site – 氨酰tRNA aa-tRNAs 结合部位 ，也称为受体部位 P部位， P (peptidyl-tRNA) site –肽酰tRNA 结合部位，也称为供体部位 E部位， E (exit) site – 空载tRNA离开核糖体之前与核糖体临时结合的部位. 肽酰转移酶（Peptidyl transferase）活性部位 – 该部位催化肽键peptide bond的形成（23S rRNA in Prokaryotes） mRNA结合部位 -小亚基 多肽链离开通道Polypeptide exit channel 蛋白质因子结合部位 5.2 遗传密码及其简并 遗传密码（genetic codon）:联系核酸的核苷酸序列与蛋白质氨基酸序列之间的纽带，具有三联体、非重叠、连续、无逗点的特点。 遗传密码子的破译是20世纪生物学重要发现之一，依赖两项技术发明： A、人工合成的核酸的体外翻译技术 B、核糖体结合技术（？） 5.2.1 三联体遗传密码的破译 物理学家Gamov通过概率的分析，认为至少三个核苷酸决定一个氨基酸才能编码20种氨基酸。 通过遗传学和生物化学支持了三联体假说 遗传学的证据：T噬菌体γII 位点AB两个基因的缺失和插入单核苷酸，获得A和B均为缺失的重组，或A和B均为插入的重组个体，发现个体均为严重缺陷型。 遗传学证据 生物化学证据 人工合成的多核苷酸模板（已知序列，提供模板） 大肠杆菌无细胞蛋白质合成系统：包括DNA、mRNA、 tRNA、核糖体、氨酰tRNA合成酶以及蛋白质因子（提供必须条件） ATP，GTP，放射性标记的氨基酸（提供能量以及方便检测） 经过硝酸纤维滤膜的过滤，能截获核糖体-氨酰基- tRNA- mRNA复合物，检测放射性标记物出现 破译了61中氨基酸密码子 遗传密码破译的蛋白质体外合成体系 终止密码子的破译 通过遗传学的证据，突变，再经过回复突变 5.2.2 遗传密码的兼并 1、密码子的兼并（degenerate） ：一个氨基酸由多个密