血清蛋白质丙烯酰胺凝胶圆盘电泳.pptVIP

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  • 2016-12-09 发布于未知
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血清蛋白质丙烯酰胺凝胶圆盘电泳

血清蛋白质聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳 蛋白质的分离 蛋白质是生物大分子化合物,具有胶体性质、沉淀、变性和凝固等特点 蛋白质分离纯化的方法主要有:盐析、透析、超离心、电泳、离子交换层析、分子筛层析等方法。 电泳技术的原理 电泳蛋白质在一定的pH溶液中可带有电荷,成为带电颗粒,在电场中向相反的电极方向泳动。由于蛋白质的分子量和电荷量不同,其在电场中的泳动速率也不同,从而将蛋白质分离成泳动速率快慢不等的条带。 电荷的来源 蛋白质带有可解离的氨基(-NH2)和羧基(-COOH),是典型的两性电解质,在一定PH条件下会解离带上电荷 迁移率 电场力 F=EQ (E:电场强度, Q:电荷) 阻力 F=6πγηυ (γ:半径,η:介质粘度) υ/E表示单位电场强度时粒子运动的速度,称为迁移率 ,也称位泳动度,以μ表示: μ= υ/E=Q/πγη 可见,离子的迁移率在一定条件下取决于粒子本身的性质, 即其所带的电荷和形状。不同的粒子有不同的迁移率,因此 电泳一定时间就可分开它们。 样品性质 与分离样品所带电荷成正比,与样品相对分子质量成反比。 电场强度 电压越高,带点粒子移动越快。 缓冲液的性质 缓冲液的PH值距等电点越远指点所带静电荷越多,迁移速度越快;反之越慢。离子强度等于1/2∑cizi2 支持介质 理想电泳支

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