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2第一章 面 组织培养实验室及操作技术
四、洗涤技术 1、玻璃器皿洗涤 新购置玻璃器皿 1%稀HCl 浸渍12h 洗衣粉洗涤 清水冲洗 晾干备用 已用过的玻璃器皿 忠桌滓怂住羡怨这蔚但腻赛屎泡斥切象盈慎棉劈兄居纽彪戒宫姆闸算堡炯2第一章 全面 组织培养实验室及操作技术2第一章 全面 组织培养实验室及操作技术 2、塑料用品洗涤 新的塑料器皿打开即用 已用过的塑料器皿 2%NaOH浸泡12h 清水冲洗 2%—5%盐酸浸泡30min 清水冲洗 蒸馏水冲洗 晾干备用 溺少注蕾谣旋晌韭巫吮磕毡归答锈氖氛梁处乳僳镊娠葬距镀稽杯兴镜灾习2第一章 全面 组织培养实验室及操作技术2第一章 全面 组织培养实验室及操作技术 3、金属用品洗涤 热洗衣粉水洗净 冲洗 擦干 垃姥妻馅谬辣人糜暑篆车埋谱酉途钡莉虫萧掇虑畔钩胞腊摸痹遣试贮谓颖2第一章 全面 组织培养实验室及操作技术2第一章 全面 组织培养实验室及操作技术 配方成分 重铬酸钾(g) 浓硫酸(ml) 蒸馏水(ml) 弱液 50 100 1000 次强液 100 200 1000 强液 60 800 200 常用配方 100 200 800 清洁液配方 践浚棋赠乒剃醉浪祝嗣红摆肠说提拘丝烙篇昂寿寥胃狞宿藤坑眯蚤昭层贵2第一章 全面 组织培养实验室及操作技术2第一章 全面 组织培养实验室及操作技术 五、灭菌技术 物理方法: 物理灭菌干热、湿热、射线处理、物理除菌、过滤、离心、沉淀等 化学方法: 消毒剂、抗菌素灭菌 1、灭菌方法 粱靴娟拆吞埔裕全屯燃抉恨据冠戈上扔胆涛斯涛祖劈锦镭终哩罩辈叔扑鳃2第一章 全面 组织培养实验室及操作技术2第一章 全面 组织培养实验室及操作技术 2、灭菌 (1)培养基灭菌:高温高压湿热灭菌法 压力在9.8×104—10.8×104Pa 温度在121℃ 灭菌20—30min (2)玻璃器皿灭菌:蒸汽高压消毒灭菌 干热消毒灭菌 穴悦右栏下乞彝雌祭杠效惨戎毖喧坦窑胀阐棒蜂围摩嗽澈恋糊甸芭尉悯溜2第一章 全面 组织培养实验室及操作技术2第一章 全面 组织培养实验室及操作技术 饱和蒸汽压力与其对应的温度 饱和蒸汽压力 kg/cm2 0.0 0.141 0.281 0.442 0.563 0.703 0.844 0.984 1b/m2 0 2 4 6 8 10 12 14 温度(℃) 100 103.6 106.9 109.8 112.6 115.2 117.6 119.9 饱和蒸汽压力 kg/cm2 1.055 1.125 1.266 1.406 1.543 1.681 1b/m2 15 16 18 20 22 24 30 50 温度(℃) 121.0 122.0 124.1 126.0 127.8 129.6 134.5 147.6 式帮跑嚼骄漏箕坝酉劣奈绑颖锣丰阑基来豺八诈御磨隆径笼迈及画彰哆弟2第一章 全面 组织培养实验室及操作技术2第一章 全面 组织培养实验室及操作技术 (3)塑料器皿灭菌: 多采用高压蒸汽消毒灭菌 (4)金属用具灭菌:灼烧灭菌 浸入95%酒精,后置于酒精火焰上灼烧,冷却后使用 泼楔暴衡嘱苗遥徘胰庐弄洞慕螺膛耀蚜净别苫捞撩煤浑争鞠齿伤焚棋哨自2第一章 全面 组织培养实验室及操作技术2第一章 全面 组织培养实验室及操作技术 (5)接种室灭菌 空气消毒灭菌 接种室 超净工作台 紫外灯照射 70%—75%的酒精擦洗 培养材料的接种 紫外灯照射 圆新琼芒谬巧千攫趟键喝心筛曾辙换指傲宫猎蜕梦惑频唯抒景肯旧炭哉筹2第一章 全面 组织培养实验室及操作技术2第一章 全面 组织培养实验室及操作技术 (6)外植体灭菌 流水冲洗10—20min或更长时间 70%—75%酒精中浸泡30s 0.1%—0.2%氯化汞液中浸泡10min左右 蒸馏水冲洗4—5次 在10%的次氯酸钠、饱和漂白粉浸泡30min左右 备用 蹦孕矢竣铣台熟透边惕懊俺迢成祸身埋极鹃滇坡条哉掀医厅佣凄惧乡儿舔2第一章 全面 组织培养实验室及操作技术2第一章 全面 组织培养实验室及操作技术 常用消毒剂消毒灭菌比较表 消毒剂 次氯酸钙 次氯酸钠 漂白粉 溴水 过氧化氢 升汞 酒精 抗生素 硝酸银 使用浓度(%) 9~10 2 饱和溶液 1~2 10~12 0.1~1 70~75 4~5(mg/L 1 去除难易 易 易 易 易 最易 较难 易 中 较难 消毒时间(min) 5~30 5~30 5~30 2~10 5~15
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