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9氨基酸发酵生产工艺学n2(阅读)
氨基酸发酵的工艺控制 培养基 pH 温度 氧 培养基 1、碳源:淀粉水解糖、糖蜜、醋酸、乙醇、 烷烃 碳源浓度过高时,对菌体生长不利,氨基酸的转化率降低。 菌种性质、生产氨基酸种类和所采用的发酵操作决定碳源种类 2、氮源:铵盐、尿素、氨水 同时调整pH值。 营养缺陷型添加适量氨基酸主要以添加有机氮源水解液。 需生物素和氨基酸,以玉米浆作氮源。 尿素灭菌时形成磷酸铵镁盐,须单独灭菌。可分批流加。 氨水用pH自动控制连续流加 3、合适C/N 氮源用于调整pH。 合成菌体。 生成氨基酸,因此比一般微生物发酵的C/N低。 4、磷酸盐:对发酵有显著影响。不足时糖代谢受抑制。 5、镁:是已糖磷酸化酶、柠檬酸脱氢酶和羧化酶的激活剂,并促进葡萄糖-6-磷酸脱氢酶活力。 6、钾:促进糖代谢。谷氨酸产酸期钾多利于产酸,钾少利于菌体生长。 7、钠:调节渗透压作用,一般在调节pH值时加入。 8、锰:是许多酶的激活剂。 9、铁:是细胞色素、细胞色素氧化酶和过氧化氢酶的活性基的组成分,可促进谷氨酸产生菌的生长。 10、铜离子:对氨基酸发酵有明显毒害作用。 11 生长因子:生物素 作用:影响细胞膜透性和代谢途径。 浓度:过多促进菌体生长,氨基酸产量低。过少菌体生长缓慢,发酵周期长。 与其它培养条件的关系:氧供给不足,生物素过量时,转化俄为乳酸发酵。 种类:玉米浆、麸皮水解液、甘蔗糖蜜和甜菜糖蜜为来源。 pH对氨基酸发酵的影响及其控制 作用机理:主要影响酶的活性和菌的代谢。 控制pH方法:流加尿素和氨水 流加方式:根据菌体生长、pH变化、糖耗情况和发酵阶段等因素决定。 控制: (1)菌体生长或耗糖慢时,少量多次流加尿素,避免pH过高 (2)菌体生长或耗糖过快时,流加尿素可多些,以抑制菌体生长。 (3)发酵后期,残糖少,接近放罐时,少加或不加尿素,以免造成氨基酸提取困难。 (4)氨水对pH影响大,应采取连续流加。 温度对氨基酸发酵的影响及其控制 菌体生长达一定程度后再开始产生氨基酸,因此菌体生长最适温度和氨基酸合成的最适温度是不同的。 菌体生长温度过高,则菌体易衰老,pH高,糖耗慢,周期长,酸产量低。 采取措施:少量多次流加尿素,维持最适生长温度,减少风量等,促进菌体生长。 氧对氨基酸发酵的影响及其控制 要求供氧充足的谷氨酸族氨基酸发酵:生物合成与TCA循环有关。 适宜在缺氧条件下进行的亮氨酸、苯丙氨酸和缬氨酸发酵:菌体呼吸受阻时产量最大。 供氧不足时产酸受轻微影响的天冬氨酸族氨基酸发酵 二、谷氨酸的生物合成机理 1. 谷氨酸 (?-氨基戊二酸) O C-OH 第一代鲜味剂 H2N- C- H L-谷氨酸单钠盐——味精 H-C-H H-C-H H-C O OH L-型 3.谷氨酸生产菌的生化特征 (1)有苹果酸酶和丙酮酸羧化酶。 (2)?-酮戊二酸脱氢酶活性弱,异柠檬酸脱氢 酶活性强,异柠檬酸裂解酶活性弱。 (3)谷氨酸脱氢酶活性高,经呼吸链氧化NADPH2 的能力弱。 (4)菌体本身利用谷氨酸的能力低。 4.谷氨酸产生菌(全是细菌) 棒杆菌属 北京棒杆菌 C. pekinense Corynebacterium 钝齿棒杆菌 C. crenatum 谷氨酸棒杆菌 C. glutamicum 短杆菌属 黄色短杆菌 B. flvum Brevibacterium 产氨短杆菌 B. ammoniagenes 小杆菌属 嗜氨小杆菌 M. ammoniaphilum Microbacterium 节杆菌属 球形节杆菌 A. globiformis Arthrobacter (1)淀粉水解糖的制备:酸水解 1、调浆:干淀粉用水调成淀粉乳,加盐酸0.5-0.8%至pH1.5。 2、糖化:蒸汽加热,加压糖化25min。冷却至80℃下中和。 3、中和:烧碱中和,至pH4.0-5.0 4、脱色:活性炭脱色和脱色树脂。活性炭用量为0.6-0.8%,在70℃及酸性条件下搅拌后过滤。 酶法糖化:以大米或碎米为原料时采用 工艺流程: 大米→清洗 →浸泡→粉碎→调浆→液化→ 添酶→压滤→(调浆)滤液加酸调pH 1.8→糖化→中和→脱
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