ACP的显示.pptVIP

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  • 2016-12-09 发布于重庆
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ACP的显示

酸性磷酸酶(ACP)的显示 目的要求 基本原理 实验用品 方法与步骤 实验结果 实验报告 …… …….. ,,,,,,,,, ……. ……. ,,,, ,,.. ,,. ,kl; 目的要求 1.熟悉酸性磷酸酶显示方法的原理及操作步骤 2.观察酸性磷酸酶在细胞中的分布 ? 基本原理 ACP在酸性条件下(pH4.7)可使作用液中的底物β-甘油磷酸钠的磷酸根解离出来,进而与溶液中硝酸铅结合形成磷酸铅沉淀,因其是难溶解的无色沉淀物,需要与黄色的硫化铵作用,生成棕黑色PbS沉淀而被显示出来。 β-甘油磷酸钠 甘油+PO3- PO4 +Pb(NO3)2 Pb2(PO4)2 Pb2(PO4)4 +(NH4)2S PbS 实验用品 1.器材:注射器、解剖用具、恒温水浴锅、载玻片、盖玻片 2.试剂: 3%淀粉溶液;ACP作用液;2%硫化铵 3.材料:小鼠腹腔液涂片 免疫动物:实验前4~6天用无菌注射器取已灭菌的3%淀粉溶液1ml注射于小鼠腹腔内,每天一次。 颈椎脱臼处死小鼠 吸取少量腹腔液,在玻片上涂层一薄层,室温晾干。 将涂片插入装有ACP作用液的染色缸中,37℃作用30分钟。取出后,蒸馏水漂洗。用10%甲醛钙溶液后固定5min。 玻片入2%硫化胺溶液作用2~3min,进行显色。取出后蒸馏水漂洗, 镜检。 对照

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