第26章酶促反应法测定生物化学物质技术方案.ppt

第二十六章酶促反应法测定生物化学物质 贵阳医学院 潘卫 第*页 血浆碳酸氢根 测定方法概述 血浆HCO3-测定方法主要有离子选择电极法、滴定法和酶速率法等。酶速率法为HCO3-直接参与化学反应，操作简单，反应特异，更适合临床常规检测。 第*页 酶法测定血浆碳酸氢根 血浆中的HCO3-在磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（PEPC）催化下，与磷酸烯醇式丙酮酸（PEP）反应，生成草酰乙酸和磷酸；草酰乙酸和苹果酸脱氢酶（MDH）反应，生成苹果酸，同时将NADH氧化成NAD+；在340nm波长处吸光度的降低与样品中HCO3-含量成正比。 第*页 ① 在准备试剂和收集标本时，应严格密封，以最大限度地减少干扰如标本中CO2的挥发； 酶法测定血浆碳酸氢根 性能评价 ②试剂浑浊或试剂空白吸光度小于1.0时都不能使用； ③内源性丙酮酸和LD对反应产生干扰，此干扰可由草氨酸钠消除。 第*页 第*页 四、血清总胆固醇 三、血清三酰甘油 一、葡萄糖 第三节 过氧化物酶指示系统测定法 过氧化物酶 指示系统 测定法 二、糖化血清蛋白 五、血清HDL-C和LDL-C 第*页 Trinder反应指示终点 生化物质在氧化酶的催化下，生成H2O2 过氧化物酶指示系统是临床生化物质 最常用的测定方法 概述 第*页 葡萄糖 测定方法概述 葡萄糖的检测方法较多，可归纳为氧化还原法（无机化学法）、缩合法（有机