第六章1-2核酸预案.ppt

第六章1 核酸----核酸通论 一、核酸化学研究史 1869年 Miescher测定淋巴细胞蛋白质组成时, 发现了不溶于稀酸和盐溶液的沉淀物, 并在所有细胞的核里都找到了此物质, 故命名“核质(Nuclein)”。 1879年 Kossel经过10年的努力,阐明除蛋白质外核质中有四种不同的组成部分: A,T, C 和 G。 1889年 Altman建议将“核质”改名为“核酸(Nuclei acid)”, 因为已经认识到“核质” 乃“核酸” 与蛋白质的复合体。 1929年 Levene 发现动物细胞的核酸含有一种特殊的核糖－－脱氧核糖, 得出了一个错误概念: 植物核酸含核糖,动物核酸含脱氧核糖。这个错误概念一直延续到1938年，这时方清楚RNA和DNA的区别。Levene还提出了核酸的“磷酸－核糖(碱基)－磷酸”的骨架结构, 解决了DNA分子的线性问题, 还在1935年提出“四核苷酸”, 认为这四种碱基的含量是一样的。 1944年 Avery研究肺炎双球菌的转化因子，证明DNA是细菌遗传性状的转化因子。 1950年 Chargaff,E和Hotchkiss,R.D.采用纸层析法仔细分析了DNA的组成成分, 得知[A]=[T], [G]=[C], [A+G]=[C+T] 1953年 Watson, Crick根据DNA的X射线图谱的研究结果, 提出了DNA的双螺旋模型(Double helix)。几星期后提出了半保留式复制模型。 1957年 Meselsnhe Stahl用密度梯度超离心法, 证实半保留复制假说。 1958年 Kornberg得到高纯度的 DNA polymerase, 这种酶需要一个模板DNA。 1960年 Cairns将复制中的细菌DNA拍电镜照片。 1961年 Brenner, Jacob等人用13C，15N标记蛋白质，用32P标记核酸的方法证实了一种新的RNA分子，命名为信使( messenger)RNA, 即mRNA。 1965年 Holley经过7年的努力测出酵母Ala-tRNA序列。 1970年 发现第一个DNA限制性内切酶。 1972年 DNA重组技术的建立。 1978年 双脱氧DNA测序法的建立。 1990年 人类基因组计划实施。 二、核酸的种类和分布 1.DNA （1）真核细胞DNA 分布在细胞核中，与蛋白质结合为染色体，双链线状。 （2）原核细胞DNA 存在核区，裸露，双链环状。 （3）细胞器（线粒体叶绿体）DNA裸露，双链环状。 （4）质粒DNA（染色体之外可自我复制的DNA）裸露，双链环状。 （5）病毒DNA 裸露，形状多样。双链线状，双链环状，单链线状，单链环状。 2.RNA （1）核糖体RNA（rRNA) 最多的一种RNA，占总RNA的75-80%。 （2）转移RNA（tRNA） 分子最小的一种RNA，占总RNA的15%。 （3）信使RNA（mRNA） 寿命最短的一种RNA，占总RNA的5%。 （4）小分子RNA（sRNA） 58-300Nts,分布广，含量少，占总RNA的0.1-1%，功能多样，如参与RNA前体加工、分泌蛋白转运、物质运输等。 （5）病毒RNA 结构多样。 RNA的功能 RNA分子在细胞中同时扮演着信息的媒介作用 和执行者的作用，mRNA为前者，rRNA、tRNA和 snRNA为后者。因此很自然的认为生命的早期可以 称为RNA world。 1. 遗传密码的中间担体(mRNA) 2. 核糖体的骨架结构(rRNA) 3. 活化氨基酸的担体(tRNA) 4. mRNA剪接等加工的活性成份(snRNA) 5. 基因表达与细胞功能的调节 5. 酶的活性成份 6. 病毒基因组的担体 二、核苷、核苷酸 （三）核苷酸的重要衍生物 第三节 核酸的共价结构 核酸的一级结构： 碱基的排列顺序 DNA 5- ATGCATGC……3 3- TACGTACG……3 RNA 5- AUGCAUGC……3 核酸的二级结构： 形成双螺旋的部分 核酸的三级结构： 空间构象 一、核酸的一级结构 一级结构为核苷酸排列顺序。 连接方式：3′，5′-磷酸二酯键 无分枝 方向： 5′ 3′ 糖和磷酸是多核苷酸主链，碱基是侧链。 碱基顺序代表核苷酸顺序。 排列顺序中储藏了信息。 顺序测定：测定碱基的顺序。 人类基因组32亿碱基对。 RNA的骨架结构 二、DNA的二级结构 （一）双螺旋模型的依据 Chargaff DNA碱基组成的等比规律。 DNA纤维的X射线衍射分析。 碱基、核苷酸的结晶学资料和物理化学数据。 RNA分子中的四个碱基 Watson-Crick的DNA双