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- 2016-12-06 发布于湖北
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3、等电点沉淀 利用蛋白质在等电点时溶解度最小这一特性,可以调溶液的pH,尽量接近它的等电点,而使蛋白质沉淀。 4、盐析法 在蛋白质的抽提液中加入一定量的中性盐,使蛋白质沉淀下来,常用的中性盐为(NH4)2SO4、NH4Cl等。 5、 电泳 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS) SDS(十二烷基硫酸钠)是一种阴离子去污剂,带有很多负电荷,与蛋白质结合以后,蛋白质分子带有足够的负电荷,远远超过了蛋白质分子原有的电荷,蛋白质分子原有的电荷就变得无足轻重了。另外,由于SDS的作用 ,改变了蛋白质单体分子的形状,均成长椭圆棒状。所以在电场上移动的速度完全取决于蛋白质分子的大小。 SDS 是一种表面活性剂 6、离子交换层析 离子交换层析是根据蛋白质所带电荷的不同进行分离纯化。常用的 阳离子交换剂为羧甲基纤维素(CM-C), 阴离子交换剂为二乙氨基乙基纤维素 (DEAE-C)。 7、凝胶过滤 也称分子排阻层析、分子筛层析,这是根据蛋白质分子大小不同来分离纯化蛋白质的一种方法。 葡聚糖凝胶(商品名Sephadex) 聚丙烯酰胺凝胶(商品名Bio-GelP) 琼脂糖凝胶(商品名因生产厂家而 不同) 常用的凝胶 : 8、亲和层析 这是根
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