信号转导研究法.ppt

以光线激发后，供体荧光基团(ECFP–X)会将激发能量转移至距离10–100 ? 以内的受体荧光基团(EGFP–Y)，使之发出荧光。通过检测受体荧光基团激发的荧光即可确认两蛋白质间的相互作用。ECFP：强化型蓝荧光蛋白；EGFP：强化型绿荧光蛋白 FRET 绕甘眷娠硒族惑衔署奶构押面岿赔翔宁众筐憎瞧曲召辙凄罐偿盗气众泪户信号转导研究方法信号转导研究方法 3. 磷酸化蛋白质研究方法: Western blot with phospho-specific antibodies. ELISA Phosphopeptide and phosphoamino acidanalysis by mass spectrophotometric analysis. 激酶活性的测定 　　信号转导过程中往往涉及多种激酶的活化，因而对这些激酶活性的测定在信号转导研究中具有重要意义。常见激酶活性的测定有PTK、PKC及PI-3K等。均有商品化的试剂盒。 档夯圆稠召翌鼠紧湘框庐侍亿蔡蛹啮匆袖睫兔乔涛肪酸迁嗅簧取澎两弟蛰信号转导研究方法信号转导研究方法 4. 基因转录活性检测 信号蛋白转录水平表达（mRNA）的检测: RT- PCR / Realtime RT- PCR Northern blot analysis. “gene chip” to measure changes in g