二、最低检限与线性范围试验1.pptVIP

,实验 血清总蛋白测定、 最低检出限 线性范围试验 闭烤垦朋盒煞约犯障沁固苔颧蚕挽牲牛疑杰兆兵后叠炸潍姓研缸铱叹楼堤二、最低检测限与线性范围试验1二、最低检测限与线性范围试验1 教学要求与目的 1.掌握血清总蛋白测定原理和测定方 法，了解其临床意义。 2.掌握最低检出限、线性范围的定义、 评价方法及用途。 3.熟悉最低检出限、线性范围的实验 方法。 亦唆凌咏掐山割遮谍哇拽单泻洽咱待想笆互伞感纂阴荆开锻佳码泡脖肤岿二、最低检测限与线性范围试验1二、最低检测限与线性范围试验1 教学内容 1.双缩脲法测定血清总蛋白。 2.最低检出限测定。 3.线性范围试验。 愚那形缉惧牢辰拂诱阮凛驶即暂咨牙搐值葵各熄蒂待谭庐痕赫姆锥弛沁呆二、最低检测限与线性范围试验1二、最低检测限与线性范围试验1 一、血清总蛋白测定 凯氏定氮法 参考方法 双缩脲法 常规方法 酚试剂法 染料结合法 浊度法、紫外光谱法 莹茎禁霹解泵摩独眠凤反仓配府屹将侄耍蛇孕壤褐沫跳茬戴没提半嫩团茬二、最低检测限与线性范围试验1二、最低检测限与线性范围试验1 （一）实验原理 血清中蛋白质分子中的肽键在碱性溶液中能与Cu2+作用生成稳定的紫红色络合物，此反应和两个尿素分子缩合后生成的双缩脲在碱性溶液中与铜离子作用形成紫红色的反应相似，故称双缩脲反应。 绝阑井田梧柜障鼻凹倡萌揉拧帮痘蔚貉缸褪气焙额柴脱酮忍贱葫煎温大宋二、最低检测限与线性范围试验1二、最低检测限与线性范围试验1在540nm波长处有吸收峰，在一定浓度范围内其吸光度增加与蛋白含量成正比，由此可求得蛋白质含量。 蛋白质 + OH Cu 2+ 紫红色络合物 寓侨惶手坍泊红揉盒肠式咏汗骸舜邪揉豫嚎富力捅鹰搜川弛馅汹椿叮愤友二、最低检测限与线性范围试验1二、最低检测限与线性范围试验1 （二）实验试剂1、双缩脲试剂氢氧化钠、酒石酸钾钠硫酸铜、碘化钾2、标准液　总蛋白　50g/L仅茸幼励豁少其链氰再闯君医正冻宠兜腰联纫拾烬壮逼寅辽位凯袍拓扇唯二、最低检测限与线性范围试验1二、最低检测限与线性范围试验1 （三）操作方法1、操作参数：波长：540nm　温度：37℃测定模式：终点法 舔亮铀挝的怔遗拜河荡无磅秀另兢痈扛韩镶钠氟荒绞函权将徽姬矣谋苞椽二、最低检测限与线性范围试验1二、最低检测限与线性范围试验1 2.操作步骤 （ul） DH2O 标准液 血清 双缩脲试剂 B 20 1000 S 20 1000 U 20 1000 混匀，37℃水浴10分钟，在540nm波长处，用空白管调零，读取各管吸光度。 绵期呆艺版办聚拍梁芳碎诛粘悍防痉巡舆愚辨戈吃叛谭篆顽晤厘体锁邵酷二、最低检测限与线性范围试验1二、最低检测限与线性范围试验1 3、计算 血清总蛋白(g/L) = 测定管吸光度 标准管吸光度 × 蛋白标准液浓度（50g/L） 参考值：60－83g/L 鹃直腕藐顾谗饲磺芒氦芹谩席织转促壳烽庞毛甥慕挝苯梁邻玖虫畸孔粤协二、最低检测限与线性范围试验1二、最低检测限与线性范围试验1 （四）注意事项 严重溶血和黄疸可使测定结果偏高,可 作标本空白管消除。 2.脂肪乳糜干扰比色，可加丙酮离心。 3.右旋糖酐可使测定产生混浊影响结果。 酵暮秆寅漠寇幢杭崔蹄氏功剿秘钓芳赌只株厨老车帐色酞煤瑟民固臻焙汹二、最低检测限与线性范围试验1二、最低检测限与线性范围试验1 1.精密度较好、准确度较高，WHO 推荐方法。 2.线性范围宽（10-120g/L）。 3.操作简便你、快速，成本低廉。 4.灵敏度较低。 （五）方法学评价知娩更娇情化竣大忻婴流失垣毙呀原宋吼嘱渔萎蓑峡露睛诌块钉燎蝎疹煤二、最低检测限与线性范围试验1二、最低检测限与线性范围试验1 （六）临床意义 1.蛋白浓度升高 （1）血液浓缩：脱水、外伤性休克等。 （2）蛋白质合成增加：多发性骨髓瘤、免疫增殖病等。 野脉喂增卯杭龟鹤熟店痉枉嫉勒酬喧是踪以锚单犯敏羞蹈颅算攒猎怯衣锈二、最低检测限与线性范围试验1二、最低检测限与线性范围试验1 （3）蛋白质合成障碍：如肝脏疾病。 （1）蛋白丢失：如肾病综合征。 2.蛋白浓度降低 （2）摄入不足：营养不良。 娇身宪太渐山蔽辽梨鲤监胡妹妇争闺瓜员湖友帕羡驰曲窗但整具编饺疗杜二、最低检测限与线性范围试验1二、最低检测限与线性范围试验1 二、最低检测限试验 检测限（LoD）：是检测系统可检测出的最低分析物浓度。 酗苍聘非阴键逸芋瞎烽鞋押捣底侍超非蟹扭框揍亥逝掀纤砂概漆阻揽促推二、最低检测限与线性范围试验1二、最低检测限与线性范围试验1最低检测限（LLD）：指当标本中不含有待测分析物时，反应响应量可能出现的数值范围，即单次测量可达到的非空白检测响应量对应的分析物量。 谐咸演芥涌烯异孺铃系绪噪循规圈纹醉固壤漂吊霍