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假昙花的组织培养与快速繁殖
张志斌 刘洋
【摘要】:以假昙花茎尖、茎段为外植体进行培养试验。结果表明:适宜的原球茎诱导的培养基为KC+5 mg/L BA+0.5~1.0 mg/L NAA;增殖培养基:KC+5 mg/L BA+0.5~1.0 mg/LNAA+0.2%蛋白胨;分化及育苗培养基:KC+0.1 mg/L NAA+0.1%活性炭。
以仙人掌科4种植物的嫩茎或子球为外植体.研究了不同培养基对其诱导和增殖的影响,同时还进行了生根和移栽试验.结果表明:珊瑚树、黄毛掌和山影掌嫩茎的
最佳诱导培养基为MS+BA2.0 mg/L+NAA0.2 mg/L、
最适增殖培养基为MS+BA0.5 mg/L+NAA0.2 mg/L,
豪氏沙布疣球子球的最佳诱导培养基为MS+BA3.0 mg/L+NAA0.2 m/L、
最适增殖培养基为MS+BA1.0 mg/L+NAA0.2 mg/L;4种仙人掌科植物在1/2 MS+IBA0.5 mg/L培养基上均能良好生根,将生根苗移栽到蛭石:河沙为1:1的混合基质中成活率达80%以上.
一种植物开放式组织培养育苗的方法,其抑菌剂母液配制方法如下:
[0019] (I)原料配比:凯松(异噻唑啉酮)3克、氯化镁23克、硝酸镁23克、山梨酸钾20克、苯钾酸钠20克、蒸馏水1000ml。
[0020] (2)母液配制:先用200ml蒸馏水稀释凯松,再用400ml蒸馏水稀释氯化镁、硝酸镁,接着用400ml蒸馏水稀释山梨酸钾、苯钾酸钠,最后将上述液体混合起来即制备成母液,并装瓶避光保存。
4、一种植物开放式组织培养育苗的方法,其是用透明无毒的普通塑料杯作为培养容器。
[0022] 5、一种植物开放式组织培养育苗的方法,其抑菌培养基的配制方法如下:
[0023] (I)按常规培配制培养基质,并根据各种植物培养所需添加无机盐、糖、激素。
[0024] (2)每IOOOml的培养基中添加抑菌剂母液按50?90ml。
[0025] (3)上述混合液配制好后,每IOOOml混合液添加20克琼脂,并将其加热至琼脂完全溶解后,分装到无毒的普通塑料杯作为培养容器。
[0026] 6、一种植物开放式组织培养育苗的方法,其接种方法如下:
[0027] (I)按常规采取植物组织。
[0028] (2)在非无菌自然环境下将植物组织接入装有抑菌培养基培养容器中。
[0029] (3)用保鲜膜将培养容器口封住。
[0030] 7、一种植物开放式组织培养育苗的方法,其接入植物组织种的培养容放置在自然环境条件下进行培养管理。
孔雀石绿可用作治理鱼类或鱼卵的寄生虫、真菌或细菌感染,对付真菌Saprolegnia特别有效孔雀石绿的有效用药浓度0.10~0.20mg/L
氯霉素属广谱抑菌抗生素,是治疗伤寒,副伤寒的首选药,治疗厌氧菌感染的特效药物之一
无水乙醇配置,母液34 mg/mL,使用浓度34ug/mL(即1:1000加入培养基)。
氯霉素溶液的配置和注意事项。
工作液、母液配制:
一般常用的工作浓度为
25μg/ml。
配制母液时,先用乙醇配成10 mg/ml,再用水稀释至1 mg/ml。该母液应冻存,并在30天内用完。
注意事项:
(氯霉素溶液应避光)
(氯霉素溶液见光分解后会变黄,出现橘黄色沉淀)
氨苄青霉素(ampicillin)(100mg/ml)溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中,最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以25ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。羧苄青霉素(carbenicillin)(50mg/ml)溶解0.5g
羧苄青霉素二钠盐于足量的水中,最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以25ug/ml
~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
卡那霉素(kanamycin)(10mg/ml)
溶解
100mg
卡那霉素于足量的水中,最后定容至10ml。分装成小份于-20
℃贮存。常以10ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
链霉素(streptomycin)(50mg/ml)溶解0.5g
链霉素硫酸盐于足量的无水乙醇中,
最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以10ug/ml~50ug/ml
的终浓度添加于生长培养基。
四环素(tetracyyline)(10mg/ml)溶解100mg
四环素盐酸盐于足量的水中,
或者将无碱的四环素溶于无水乙醇,
定容至10ml。
分装成小份用铝箔包裹装液管以免溶液见光,于-20℃贮存。常以10ug/ml~50ug/ml的终
浓度添加于生长培养基。
一般来说养细胞用青+链,防霉用叠氮钠,原核表达的工程菌一般都有萘啶酸或者四环素抗性,看具体菌株而定了。控制杂菌污染还是要做好消毒和无菌操作,靠抗生素是
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