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医学分子生物学 二、医学分子生物学发展简介 1、孕育阶段（1869-1952） 1869年，德国，Miescher,发现核素chromatin 1928年，英国，Griffith, 发现转化现象 1944年，美国，Avery，肺炎双球菌离体实验 1952年，HersheyChase,噬菌体T2的感染实验1970 年，美国约翰·霍布金斯大学的 h. smith 于偶然中发现，流感嗜血杆菌 （haemophilus influenzae）能迅速降解外源的噬菌体 dna ，其细胞提取液可降解 e.coli dna ，但不能降解自身 dna ，从而找到 hindⅱ 限制性内切酶。 3、发展阶段（1973-） 1972年美国斯坦福大学的Berg P等用限制性内切酶EcoRⅠ在体外切割猴病毒SV40和λ噬菌体DNA，再用T4DNA连接酶把两种不同来源的DNA片段连接成一个片段，完成了世界上第一个DNA体外重组。 1973年Cohen等人不仅完成了体外DNA重组，而且还将这种重组DNA分子成功地转化到大肠杆菌中，成功地进行了第一次基因克隆。建立了质粒－大肠杆菌这种第一个基因克隆系统，为利用体外重组DNA技术开展基因工程研究开辟了道路。 1975年，Bishop Varmus 在Rous 肉瘤病毒（RSV）中发现第一个癌基因V-src，获1989年诺贝尔医学和生理学奖 Varmus与自己长期的合作伙伴J.??Michael??Bishop一道，共同提出了一种癌症发生的新理论：癌症这种疾病的产生是由于我们人体正常基因中的某些基因发生了变异的结果，这些变异或者由外来致癌因子引起，或者是因人体细胞在分裂和DNA复制过程中出现的差错所致。 1976年,Kam用重组DNA技术首次成功进行α-地中海贫血纯合子（即胎儿水肿）的产前诊断。 1977年Sanger等创造了双脱氧链末端终止法测定DNA序列，同时美国Maxam和Gilbert 发明了化学裂解法。 1978年，人类基因文库建立。 1981年Cech T 和 Altman 从四膜虫中发现具有催化活性RNA，称为核酶Ribozyme 1989年获诺贝尔化学奖。 1985年Mullis 首创PCR。1993年获诺贝尔奖 1989年经美国FDA和NIH批准，Blaese Anderson 首次在一患严重复合免疫缺陷的四岁病儿进行腺苷脱氧酶基因导入，标志人类基因治疗的开始。 1990年，美国启动人类基因组计划中国：人、鸡、水稻、表皮葡萄球菌、痢疾杆菌、赖氏钩端螺旋体 2000年，后基因组计划（蛋白质组计划） 三、医学分子生物学研究领域 基因 基因是遗传的基本单位 基因Gene ? 1869年，Miescher,发现核素chromatin ? 1909,W.Johannsen. Gene＝遗传因子（Mendel） ? 1926, T.H.Morgan:　基因在染色体上直线排列 ? 1944,O.T.Avery: 基因的本质是DNA ? 1955, S.Benzer: 顺反子（Cistron）,一个顺反子就 是一个基因，或编码蛋白，或编码RNA 1961, F.Jacob J Monod: 操纵子，原核基因调控 基因：能够表达和产生蛋白质或RNA的DNA序列，是决定 　　　遗传性状的功能单位。 Gene: The basic unit of heredity. Contains theinformation for making one RNA and, inmost cases, one polypeptide 　 结构基因 基因中编码RNA或蛋白质的DNA序列 原核生物:连续 真核生物:断裂;外显子+内含子;RNA剪接,GT-AG法则 一个结构基因，其5→3链为编码链coding strand，可编码氨基酸，3→5链为反编码链，其碱基顺序与编码链互补，是mRNA合成的模板。 原核生物的基因是一个连续编码的DNA分子的一个片段。 真核生物包括人类基因，DNA顺序包括编码顺序和非编码顺序两部分。编码顺序在DNA分子中是不连续的，被非编码顺序隔开，形成镶嵌排列的断裂形式，因此称为断裂基因。 真核细胞的结构基因中含有的编码顺序，称为外显子exon。两个外显子之间的顺序无编码功能，称为内含子intron。不同结构基因所含内含子数目和大小也不同。 在每个外显子和内含子的接头区存在高度保守的一致顺序，称为外显子-内含子接头，即在每个内含子的5端开始的两个核苷酸为GT，3端末尾是AG，这种接头形式即为通常所称的GT-AG法则。 一般来说，真核生物的结构基因多为断裂基因，断裂基因中内含子和外显子的关系并非是固定不变的。有时可以见到这样的情况：在同一条DNA分子上的某一段DNA顺序，