第二章 蛋白质3幻灯片.pptVIP

C、肼解法 （多肽链C-端氨基酸分析法） 肼化物 苯甲醛 不溶物 3）循环顺序分析法 Edman，1956年，N-端分析法 特点：不断重复循环，将肽链N-端氨基酸残基逐一进行标记和解离 （PTC） （PTC-多肽） （PTH-氨基酸） 广泛应用的一种生化分析仪 氨基酸顺序分析仪 自动化程度高 可测定只有10-3mg的样品 例题： 有一7肽，经分析氨基酸的组成是：Lys、Leu、Arg、Phe、Ala、Tyr、Ser； 此肽与DNFB反应产生DNP-Phe； 经糜蛋白酶作用，该肽断裂成游离的Phe和两个肽段，两个肽段的氨基组成分别为Ala、 Tyr、 Ser和Leu、 Lys 和Arg，两个肽段与DNFB反应分别产生DNP-Ser和DNP-Lys；（糜蛋白酶只水解芳香族氨基酸的羧基端的肽键） 此7肽与胰蛋白酶作用，只产生两个肽段（胰蛋白酶只水解Lys或Arg的羧基端肽键）。 问：此7肽的一级结构是什么？并简要写出分析过程 解答： 1）与DNFB反应产生DNP-Phe，得N端为Phe； 2）经糜蛋白酶作用，此肽断裂为Phe和两个肽段Ala， Tyr， Ser与Leu、Lys、Arg，推测该肽端第四位为Tyr（糜蛋白酶作用点）； 3）两个肽段与DNFB作用分别产生DNP-Ser和DNP-Lys，得该肽第二位为Ser，第三位为Ala，第5 位为Lys； 4）此7肽与胰蛋白酶作用，只