维生素C对蛙坐骨神经腓肠肌标本收缩性的影响.docVIP

维生素C对蛙坐骨神经腓肠肌标本收缩性的影响摘 要：维生素C又名抗坏血酸，是白色结晶或结晶性粉末，无臭，味酸，久置颜色逐渐变微黄；受光照则逐渐变褐，干燥状态下在空气中相当稳定，但在空气存在下于溶液中则迅速变质，pH值3.4～4.5时较稳定。在水中易溶，在乙醇中略溶，在氯仿或乙醚中不溶。闪点99℃；熔点187℃～192℃，熔融时同时分解。呈强还原性，有抑制多酚氧化酶作用。关键词：材料；步骤；方法；中图分类号：R741 文献标识码：A 文章编号：1674-3520（2014）-12-00-02动物生理学研究显示，近几十年来为如何提高畜产品质量提供科学依据，为不同的动物，提供不同的营养配方，进一步利用智能化的计算机对动物个体进行诊断并给予营养配方，运用饲养成果的检测与评价，调整饲料营养配方，以达到提高畜禽产品的质量，预防和治疗疾病的效果，提高人们生活水平的研究越来越多。维生素C一般有以下几种存在方式，维生素C[英文名：Vitamin C （L-Ascorbic acid）]、维生素C 100目（百目维生素C）、维生素C颗粒[维生素C-DC97]等等。本实验采用的是维生素C颗粒。详细信息如下：白色至微黄色固体颗粒，是由维生素C和淀粉按一定比例制成，作用与维生素C基本相同，维生素C颗粒具有较好的流动性、可压性和易混合性，色泽稳定，用于口服和咀嚼片的直接压制，也可用于维生素矿物质复合片的压制，性状白色至微黄色固体颗粒：砷≤0.0003%，重金属（以Pb计）≤0.001%，干燥失重≤0.20%，含量96%～98%。肌细胞疲劳的详细机制尚不完全清楚，目前认为可能与下列因素有关。能源物质耗竭 剧烈运动后肌肉之所以出现疲劳，原因之一是由于能源物质的耗竭。从肌肉收缩的细胞学机制可以看出，肌肉的收缩和舒张都有赖于三磷酸腺苷，因此三磷酸腺苷的缺乏将导致肌肉收缩和舒张功能的障碍。但研究证实[6]，甚至在高强度运动疲劳时细胞内的三磷酸腺苷也很有下降到运动前水平的70%以下，因此认为运动疲劳的原因不在于三磷酸腺苷本身，可能是由于其他原因降低了三磷酸腺苷酶的活性使其利用率降低，或是由于三磷酸腺苷再合成时的后备能源。一、实验材料选用规格相近，色彩鲜艳，健康活泼的蛙30只，Pclab-UE生物医学信号采集仪，蛙类解剖器械，任氏液、维生素C。二、方法及步骤（一）分组选用规格相近，色彩鲜艳，健康活泼的蛙30只，经典方法制备腓肠肌标本，分别置于25℃的维生素C浓度分别为0mmol/L、1.0 mmol/L、2.0 mmol/L、3.0 mmol/L、4.0 mmol/L 、5.0 mmol/L 、6.0 mmol/L 、7.0 mmol/L的任式液中浸泡5分钟待测。（二）蛙坐骨神经腓肠肌标本制作1、分离坐骨神经 取一条腿放置在蛙板上，用一根固定针将粗制标本的脊柱固定在蛙板上（腹面朝上），将下肢拉直并向外旋转趾蹼朝上，用固定针在跖骨部固定在蛙板上，用玻璃分针沿脊柱旁游离坐骨神经至尾骨处、再循坐骨神经沟（股二头肌和半膜肌之间的裂逢处），找出坐骨神经的大腿段，用玻璃分针仔细剥离，剪断坐骨神经的所有分支，并将神经分离直至膝关节处。2、分离腓肠肌 用玻璃分针或镊子将腓肠肌跟腱分离，并穿线结扎。在结扎远端用粗剪刀剪断跟腱，左手执线提起腓肠肌，以手术剪刀剪去其周围联系的组织，但保留腓肠肌起始点与骨的联系，唯须注意勿损伤支配该肌的神经分支。3、游离坐骨神经腓肠肌标本 将该后肢股部所有肌肉从膝关节起沿股骨剥离并剪去，以粗剪刀在股骨上中1/3处剪断股骨，剪下一小段与神经相连的脊柱（约3个脊椎骨）在膝关节下将小腿剪掉，留下的即为坐骨神经腓肠肌标本。4、检查标本的兴奋性 用经任氏溶液润湿的锌铜弓轻轻接触一下坐骨神经，如腓肠肌发生迅速而明显的收缩，则表明标本的兴奋性良好，即可将标本放在盛有任氏液的培养皿中，以备实验用。若无锌铜弓，亦可用中等强度单个电刺激作上述试验。（三）试验过程1、配置含有不同浓度的维生素C的任氏液8组，在25摄氏度下保温，浓度分别为0mmol/L（对照组）、1.0 mmol/L、2.0 mmol/L、3.0 mmol/L、、4.0 mmol/L 、5.0 mmol/L 、6.0 mmol/L 、7.0 mmol/L。（其中一组为对照组，七组为预试验，待找出适宜范围后，再分三组进行比较试验）。2、随机选择规格相近，色彩鲜艳，健康活泼的牛蛙30只。以上方法制备蛙坐骨神经腓肠肌标本，分别置于含不同浓度的维生素C的任氏液中浸泡5分钟待测3、打开计算机，启动生物信号采集处理系统，进入“刺激频率对骨骼肌收缩的影响”模拟实验菜单，用计算机生物信号采集处理系统进行。以波宽为1ms，从最小刺激强度开始逐渐增加刺激强度对肌肉进行刺激，找到刚刚引起肌肉最大收缩的刺激强度，即为该标本的最适刺激强度，整