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实验、细菌的分布、消毒灭菌与药敏试验 实验目的 1.了解培养基的制备程序及其常用种类, 了解细菌的接种方法。 2.学会不同部位细菌的检查方法,掌握常用消毒灭菌方法,认识并学会使用常用的消毒灭菌器 3.了解药敏试验的临床意义 4.了解常用的物理化学消毒灭菌方法 实 验 内 容 一、细菌的人工培养 (录像) 1.培养基的制备 2.细菌的接种方法 (1)斜面接种法 (2)液体接种法 (3)划线分离接种法 二、常用的消毒灭菌器 三、细菌的分布与消毒灭菌 (一)细菌的分布检查 1.空气中微生物的检查:取2普通琼脂平板分别放置于实验室不同地点将盖打开暴露于空气15分钟后盖上盖,在底面做标记:班级、空气、某地,置37℃恒温箱中培养18—24小时后观察结果。 2.咽喉部细菌的检查: 咽拭子法:取1普通琼脂平板,分1、2两个区,用蜡笔做标记:咽拭子、班级、学号。两位同学分别用无菌棉签于咽喉部采集标本接种于平板1、2号区,置于37℃恒温箱中培养后观察结果。 (二)消毒灭菌实验 1.皮肤消毒实验:每2人/组,取1普通琼脂平板,用蜡笔画线分5个区,分别标:1.2.3.4.5;两人分别用香皂洗后的手指在1、3区接种,然后用碘伏消毒手指后分别在2、4区用消毒后的手指后接种,5区做空白对照,盖好盖、做好标记、置于37℃恒温箱中培养后观察结果。 2. 紫外线杀菌实验:取1普通琼脂平板,用蜡笔做标记写:紫外线、班级,用无菌棉签蘸取菌液均匀接种后,用无菌镊子把长方形纸片贴与平板中央,将其置于紫外灯下20-30厘米处照射30分钟,除去纸片后置于37℃恒温箱中培养后观察结果。 3.药敏试验(纸片法) 取1普通琼脂平板,用蜡笔画线分4个区,分别标1、2、3、4,做标记,写班级、学号;用无菌棉签蘸取菌种均匀涂于平板上,待平板稍干后用镊子分别夹取抗生素药敏纸片,依次是:增效联磺片、罗红霉素、头孢类药、空白对照,盖上盖,置于37℃恒温箱中培养后观察结果。 药敏试验操作 药敏试验的意义 1.以利于筛选有效的抗生素,提示所需剂量,帮助临床医生选用最佳药物及剂量,治疗感染性疾病,减少、防止耐药菌株的出现 2.可以进行流行病学调查,了解耐药菌株的流行情况,为抗菌药物的社会应用提供依据。 药敏试验现象(参照) 作 业 1.实验结果的观察 (1)空气中细菌的检查现象与结论 (2)咽喉部细菌的检查现象与结论 (3)紫外线杀菌试验现象与结论 (4)皮肤消毒试验现象与结论 2.药敏试验的临床意义何在? 3.通过实验谈谈你对养成良好卫 生习惯和无菌操作重要性的理解
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