病料中可疑病原菌的分离.docxVIP

病料中可疑病原菌的分离、培养与鉴定病料：怀疑为大肠杆菌、沙门氏菌或葡萄球菌感染的鸡或鸭大肠杆菌、沙门氏菌或葡萄球菌特性对比项目葡萄球菌大肠杆菌沙门氏菌形态及染色特性G+ 圆形G- 杆形、两端钝圆G- 直杆状麦康凯培养基生长不生长生长，红色菌落生长，无色菌落VP+--吲哚+-乳糖产酸 不产气产酸 产气/ 不发酵不发酵蔗糖产酸 不产气VV葡萄糖产酸 不产气产酸 产气产酸 产气麦芽糖产酸 不产气产酸 产气产酸 产气甘露糖产酸 不产气产酸 产气产酸 产气三糖铁三糖铁： A为产酸（黄色），K为产碱（红色），+为阳性，-为阴性。病料 分离 培养 鉴定1.病料分离培养病料 划线 平皿(普通琼脂) 37℃ 24-48h 描述细菌在两种固体培养基中的生长表现。画线方法2.细菌的移植挑取平板中的单个菌落 制菌片作G染色镜检确定单菌落 接种 普通琼脂和麦康凯斜面 37℃ 24-48h 生化鉴定细菌纯培养划线方法3.生化鉴定纯培养 接种生理生化培养基 37℃ 24-48h 鉴定1.单糖发酵管接种：葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露糖、蔗糖2. 生理生化培养基接种：(1)普通肉汤37℃ 24-48h 生长观察及Indole试验(2)蛋白胨水37℃ 24-48h Indole 试验(3)葡萄糖蛋白胨水37℃ 24-48h MR/VP(4)三糖铁培养基37℃ 24-48h 观察底层/斜面是产酸,还是产碱，底层是否产气/H2S附:葡萄球菌形态染色：球形或稍呈椭圆形，直径1.0um左右，排列成/view/5119.htm葡萄状。葡萄球菌无/view/32140.htm鞭毛，不能运动。无/view/426085.htm芽胞，除少数菌株外一般不形成荚膜。易被常用的碱性染料着色，革兰氏染色为/view/1342149.htm阳性。其衰老、死亡或被/view/9572.htm白细胞吞噬后，以及耐药的某些菌株可被染成革兰氏阴性。培养特性：营养要求不高，在普通培养基上生长良好，在含有血液和葡萄糖的培养基中生长更佳，需氧或兼性厌氧，少数专性厌氧。28~38℃均能生长，致病菌最适温度为37℃，PH为4.5~9.8，最适为7.4。在肉汤培养基中24小时后呈均匀混浊生长，在/view/1104.htm琼脂平板上形成圆形凸起，边缘整齐，表面光滑，湿润，不透明的/view/7118.htm菌落。不同种的菌标产生不同的色素，如金黄色、白色、柠檬色。色素为脂溶性。葡萄球菌在/view/901364.htm血琼脂平板上形成的菌落较大，有的菌株菌落周围形成明显的完全透明溶血环（β溶血），也有不发生溶血者。凡溶血性菌株大多具有致病性。生物学反应：多数葡萄球菌能分解葡萄糖、/view/36224.htm麦芽糖和蔗糖，产酸不产生气。致病性菌株能分解/view/32511.htm甘露醇。大肠杆菌大肠杆菌（Escherichia coli，E.coli） 革兰氏阴性短杆菌，大小0.5×1～3微米。周生/view/32140.htm鞭毛，能运动，无/view/44590.htm芽孢。能发酵多种糖类产酸、产气。沙门氏菌形态染色：沙门氏菌革兰氏阴性、两端钝圆的短杆菌（比大肠杆菌细），（0.7～1.5μm）×（2～5μm）散在，无/view/32123.htm荚膜和芽孢，（除/view/1848950.htm鸡白痢沙门氏菌、/view/1909666.htm鸡伤寒沙门氏菌外）都具有周身鞭毛，能运动，大多数具有菌毛，能吸附于宿主细胞表面或凝集/view/31110.htm豚鼠红细胞。培养特性：1）需氧及兼性/view/462.htm厌氧菌。2）在普通琼脂培养基上生长良好，培养24h后，形成中等大小、圆形、表面光滑、无色半透明、边缘整齐的菌落，其菌落特征亦与大肠杆菌相似（无粪臭味）。3）/view/1524750.htm鉴别培养基（麦康凯、SS、伊红美蓝）：一般无色菌落。4）三糖铁琼脂斜面：斜面为红色，底部变黑并产气。生化特性：1）发酵/view/16023.htm葡萄糖，麦芽糖，甘露醇和山梨醇产气；2）不发酵乳糖、/view/84040.htm蔗糖和/view/1712187.htm侧金盏花醇；3）不产/view/371441.htm吲哚、V-P反应阴性；4）不水解/view/42264.htm尿素和对/view/418479.htm苯丙氨酸不脱氨。