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基因的转移与重组比较 基因来源 转移方式 类型 接合 供体菌 通过性菌毛 转化 供体菌 摄入 转导 供体菌 噬菌体为载体 转换 噬菌体 溶原性整合 第五节 遗传学在医学上的应用 疾病的诊断与防治 检测致癌物 流行病学 分子生物学 基因工程 移码突变 移码突变(frame-shift mutation)指诱变剂使DNA分子中的一个或少数几个核苷酸的增添(插入)或缺失,从而使该部位后面的全部遗传密码发生转录和转译错误的一类突变。 原序列 5‘-AUG CCU UCA AGA UGU GGG Met Pro Ser Arg Cys Gly (1)同义突变 5‘- AUG CCU UCA AGA UGU GGA Met Pro Ser Arg Cys Gly (2)错义突变 5‘- AUG CCU UCA GGA UGU GGA Met Pro Ser Gly Cys Gly (3)无义突变 5‘- AUG CCU UCA AGA UGA GGA Met Pro Ser Arg (4)移码突变 5‘-AUG CCU UCA AGU GUG GG Met Pro Ser Ser Val 基因突变的修复 光复活作用 切除修复 重组修复 SOS修复 光复活作用(photoreactivation) 把经紫外线照射后的微生物立即暴露于可见光下时,可明显降低其死亡率的现象,称为光复活作用。 由于在一般的微生物中都存在着光复活作用,所以在进行紫外线诱变育种时,只能在红光下进行照射及处理照射后的菌液。 暗修复作用(dark repair) 暗修复作用又称切除修复(excision repair),是细胞内的主要修复系统,用于修复被诱变剂(包括紫外线、烷化剂、X射线和γ射线等)损伤后的DNA的机制。全部修复过程由四种酶完成,即 ①内切核酸酶在胸腺嘧啶二聚体的5’一侧切开一个3’- OH和5’-P的单链缺口; ②外切核酸酶从5’-P至3’-OH方向切除二聚体,并扩大 缺口; ③DNA聚合酶修补缺口 ④连接酶连接裂口 重组修复 一种越过损伤的修复机制,即通过交换,在嘧啶二聚体相应部位的子链上出现了缺口,该缺口由DNA聚合酶和连接酶修复。 亲本链的嘧啶二聚体需切除修复 一种能够引起误差修复的紧急呼救修复,是在无模板DNA 情况下合成酶的诱导修复。正常情况下无活性有关酶系,DNA受损伤而复制又受到抑制情况下发出信号,激活有关酶系,对DNA损伤进行修复,其中DNA多聚酶起重要作用,在无模板情况下,进行DNA修复再合成,并将DNA片段插入受损DNA空隙处。 SOS修复 SOS修复 修复基因:lexA、 recA、 uvrA、uvrB、uvrC 修复机理: lexA为调节基因,产生的阻遏蛋白在正常条件下与recA、uvrA、uvrB、uvrC的操作子结合,使细胞内仅合成少量的uvr蛋白(修复蛋白),对自发突变产生的低水平的损伤进行修复。当细胞内产生大量嘧啶二聚体时,在复制过程中因不能得到修复而在子链上留下空隙和单链,少量的RecA蛋白立即与单链结合并激活其活性, RecA蛋白 降解LexA阻遏蛋白,解除了对RecA蛋白和其他修复蛋白基因的抑制,对大量的二聚体进行切除修复。 二、 基因的转移和重组 转化 transformation ? 定义:受体菌直接摄取供体菌游离的DNA, 使受体菌获得新的遗传性状 ★ 受菌处于感受态 小鼠体内肺炎链球菌的转化试验 接合 conjugation 细菌通过性菌毛互相连接沟通,将质粒或染色 体DNA从供体菌转移给受体菌的过程 ? 接合性质粒: F质粒、R质粒、C0L质粒、毒力质粒 ? 非接合性质粒 接 合 ★ 定义: 以噬菌体为媒介,将供菌的DNA转 移到受菌内,使受菌获得新的遗传性状。 ★ 根据转导DNA片段的范围分为: 转导 ( transduction ) 1、普遍性转导 2、局限性转导 完全转导 流产转导 定义:供体菌DNA的任何片段都有可能被误 装入噬菌体外壳内,通过噬菌体进入受菌, 故称普遍性转导。 ★ 错误包装 ★ 毒性
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