阪崎肠杆菌研究进展课件.ppt

中国检验检疫科学研究院食品安全研究所 CSB克罗诺杆菌筛选肉汤（g/L） 蛋白胨 10； 肉浸粉 3； 氯化钠 5； 溴甲酚紫 0.04； 蔗糖 10； 万古霉素 10mg； pH7.4±0.1 最佳培养温度：42?C 中国检验检疫科学研究院食品安全研究所 两种显色培养基的成分差别 中国检验检疫科学研究院食品安全研究所 底物的种类和特点 荧光类 水溶性；受pH值影响；强烈扩散；需紫外灯 吲哚类（吲哚衍生物）（新型酶底物） 稳定性好；5-Br-4-Cl-3-吲哚（X）：蓝绿色 5-Br-6-Cl-3-吲哚（Y）：洋红色 6-Cl-3-吲哚：鲜肉色 6-F-3-吲哚：胭脂红 酚类 如：儿茶酚，苯磷二酚 其他 间接反应 直接反应 中国检验检疫科学研究院食品安全研究所 克罗诺杆菌表型特征和遗传特征试验的结果区别 X-α-Glu，0.1g/L,3.8%克罗诺杆菌在显色培养基为阴性，当增加到0.15g/L时，又可以变成蓝绿色菌落； 肠杆菌科其他菌32%-46%也是阳性。 中国检验检疫科学研究院食品安全研究所 表型和遗传试验鉴定克罗诺杆菌的结果差异评价 底物反应比商品化显色培养基灵敏度更高，尤其是Cronobacter sakazakii和Cronobacter dublinensis； α-葡萄糖苷酶并非100%都能表达，传统反分离方法存在漏检可能0.5-4.3%； 通过遗传特征的鉴定效率更高一些； API20E鉴定克罗诺杆菌属的符合率（从好的鉴定到最好的鉴定）仅70%； 中国检验检疫科学研究院食品安全研究所 根据rpoB基因设计的引物可以将克罗诺杆菌属各种区分开 中国检验检疫科学研究院食品安全研究所 建议重新修订阪崎肠杆菌行业标准 阪崎肠杆菌的命名及分类学方面已产生变化 国标没有快速筛选方法 附录中增加阪崎肠杆菌可以鉴定到种的方法 中国检验检疫科学研究院食品安全研究所 影响乳粉安全的食源性致病菌研究 背景： 乳粉作为一种特殊食品，近年来连续引发了与安全相关的事件而受到国际相关组织、各国政府的高度重视及国民的广泛关注，但现行的乳粉卫生标准已不能够满足乳粉安全的要求，开展影响乳粉安全的食源性致病菌方面的研究急需而紧迫。 获得的资助： 科技部社会社会公益研究专项“乳粉中新出现的致病菌研究及其风险评估” (2004DIA2J004) ； 国家质检总局“乳品中阪崎肠杆菌检测方法研究” （2004IK097）的资助。 中国检验检疫科学研究院食品安全研究所 研究成果 应用分子生物学手段和对传统方法进行创新性改进技术，形成了对肺炎克雷伯氏菌等16种潜在致病菌的检测方法体系； 制订了《乳粉卫生微生物学检测方法》13项行业标准、10项《进出口婴幼儿配方粉柠檬酸杆菌等计数与检测方法》国家标准； 对乳粉中16种潜在致病菌进行了风险评估； 首次对我国进口及进口原料生产的487份奶粉样品中阪崎肠杆菌污染状况进行了调查。 发表文章47篇；申请专利1项。 中国检验检疫科学研究院食品安全研究所 对阪崎肠杆菌的分离鉴别方法、表型特征分类进行了系列研究 中国检验检疫科学研究院食品安全研究所 小结 1980年，该菌被正式定名为阪崎肠杆菌，属于肠杆菌属的一个种，分为15个生物群； 2008年，分类学方面发生变化，根据《系统与进化微生物学国际期刊》官方杂志公布，1个新组合，4个新种，三个新亚种，克罗诺杆菌属为新属。目前阪崎肠杆菌已分为6个种。 克罗诺杆菌属各代表种： C. sakazakii ，ATCC 29544（相当于NCTC 11467）； C. malonaticus ，CDC 1058-77，相当于LMG 23826和DSM 18702； C. turicensis，z3032，（相当于LMG 23827和DSM 18703）； C. genomospecies 1 ，NCTC 9529； C. muytjensii，ATCC 51329（相当于CIP 103581）； C. dublinensis，DES 187（相当于LMG 23823和DSM 18705）。 C. dublinensis subsp. dublinensis，DES 187（相当于LMG 23823和DSM 18705）； C. dublinensis subsp. lausannensis，E515（相当于LMG 23824和DSM 18706）； C. dublinens