E-mail:1223wxj@163.com QQ:4 课题1:DNA粗提取与鉴定 学习目标 知识目标 1、通过尝试对植物或动物组织中的DNA进行粗提取,了解DNA的物理化学性质。 2、理解DNA粗提取与鉴定的原理。 能力目标 掌握DNA粗提取及鉴定方法,能利用DNA的性质进行实验设计和操作。 态度观念目标 通过对DNA的粗提取的实验过程的设计及操作,锻炼科学的思维方法,培养实事求是的科学态度。 1、鸡血细胞做实验材料,一是因为鸡血细胞核的DNA含量丰富,材料易得;二是鸡血细胞极易吸水胀破。 2、DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同, 3、嫩肉粉的主要成分是木瓜蛋白酶,其作用是分解蛋白质,使提取出的DNA纯度较高 4、预冷的乙醇溶液具有以下优点:一是抑制核酸水解酶活性,防止DNA降解,二是降低分子运动,易于形成沉淀析出,三是低温有利于增加DNA分子柔韧性,减少断裂; 5、洗涤剂等去污剂可以溶解细胞的细胞壁,破坏细胞膜,同时也能使蛋白质变性; 6、在60—75度条件下加温处理,蛋白质变性,而DNA结构不会受到破坏,提取纯度较高的DNA 7、甲基绿能使DNA染成绿色 根据以上原理可设计提取和纯化DNA的方案: 方案一:30mL含DNA的滤液+2mol/L NaCl→同方向搅拌,DNA溶解→加入蒸馏水→DNA析出→过滤得到过滤物→放到2mol/LNaCl溶液中溶解→DNA-
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