GCMS结合AMDIS和保留指数研究不同炮制火候麸炒白术挥发性成分动态变化规律.docVIP

GCMS结合AMDIS和保留指数研究不同炮制火候麸炒白术挥发性成分动态变化规律 　　[摘要]为了研究白术麸炒过程中从炒轻、炒黄、炒焦到炒炭不同炮制火候其挥发性成分的动态变化规律，该实验采用不同炮制时间点取样的方法得到不同炮制火候白术样品，采用水蒸气蒸馏法测定各样品挥发油含量，采用静态顶空进样提取白术中挥发性成分，气相色谱质谱联用（GCMS）和自动质谱退卷积定性系统（AMDIS）结合Kováts保留指数（retention index，RI）对挥发性成分进行分析。结果在麸炒过程中，随炮制程度加深麸炒白术挥发油含量呈4个阶段阶梯降低，白术挥发性成分在组成和含量上均有显著变化。研究结果表明白术在麸炒过程中挥发性成分的动态变化与炮制火候密切相关，且白术和蜜麸之间存在相互吸附作用，这可为阐明麸炒白术炮制机制提供科学依据。 　　[关键词]白术； 炮制火候； 挥发性成分； GCMS； AMDIS； 保留指数； 动态变化 　　白术为菊科苍术属植物白术Atractylodes macrocephala Koidz的干燥根茎，具有健脾益气，燥湿利水，止汗，安胎的功效[1]，被誉为“补气健脾第一要药”。从古至今，白术的炮制方法很多，有麸炒、土炒、清炒、蒸制等规格[2]，但目前还是以麸炒应用最广，《中国药典》201.5年版也仅收录了白术饮片和麸炒白术2种规格[1]。炒法作为主要炮制方法，也有炒黄、炒焦、炒炭等不同炮制程度之分。传统理论认为，白术生品燥性太强，经麸炒后，可降低辛燥之性，增强健脾燥湿，导滞止泻的作用[3]。挥发油为白术主要有效成分之一，也为白术燥性的来源[4]，需经炮制抑制其辛燥之偏性，但也要抑之有度，传统认为麸炒白术炒黄为佳，临床上也多以麸炒黄品入药。目前对白术挥发油的研究多为炮制前后化学成分的比较[57]，对白术炮制过程中挥发油的动态变化未见报道。 　　本实验首次以不同炮制时间点麸炒白术为研究对象，采用静态顶空进样，GCMS结合AMDIS 和Kováts保留指数，对不同炮制时间点麸炒白术的挥发性成分的动态变化进行研究，为阐释麸炒白术炮制机制提供科学依据。 　　1材料 　　Agilent 7890A GC气相色谱仪，Agilent 5.975C MSD质谱仪，Agilent 7697A HS 顶空进样器，色谱数据处理系统（MSD Chemstation Data Analysis Application，AMDIS Chromatogam），NIST 1.1质谱数据库。正构烷烃混合对照品C7～C30（Sigma公司，编号4.94.5.1U）。3.80Lc 型二维红外成像仪（德国 DIAS 公司），CY900型炒药机（南京宏钢盛机械设备厂）。 　　白术由四川新荷花饮片公司提供，经成都中医药大学卢先明教授鉴定，为菊科植物白术A macrocephala的干燥根茎。 　　2方法及结果 　　2.1麸炒炮制品的制备 　　麸炒白术由四川新荷花饮片公司进行炮制。炮制过程中采用二维红外成像仪检测炒药机的锅底温度，等温度达到2.80 ℃加入蜜麸，待冒烟时，迅速加入净白术，净白术与蜜麸投料比为10∶1，在炒制过程中，从4 min开始，每隔几分钟取样1次，每次取样约1 kg，炒至30 min结束，各取样时间点样品的外观性状、火候程度见表1。 　　2.2各样品挥发油含量测定 　　取各白术样品粉末（过2号筛）各约50 g，分别置 1 000 mL圆底烧瓶中，各加蒸馏水500 mL，浸泡2 h，照《中国药典》201.5年版（通则2.204）挥发油测定法甲法测定，结果见表1。 　　白术麸炒后随炮制时间延长，挥发油含量随炮制火候变化呈4个阶段梯度降低。在炒轻时，挥发油含量基本不变；炒至8～1.6 min达到炒黄阶段时，含量降低至生品的84.72%；至20～2.6 min炒焦状态时，又继续降低至63.92%；当炒至30 min炒炭阶段时，含量急剧下降，只有生品含量的1.93.7%。 　　2.3各样品挥发性成分分析 　　2.3.1顶空条件 　　取白术粉末（3号筛）各05 g，精密称定，放入容量为20 mL的顶空进样瓶中，密封，置顶空进样器中进样。顶空进样参数：样品瓶加热温度1.20 ℃，样品环温度1.40 ℃，传输线温度1.60 ℃，样品瓶加热时间10 min，样品环平衡时间05 min，进样时间1 min。 　　2.3.2GCMS分析条件 　　色谱柱HP5MS 5% Phenyl Methyl Siloxane （02.5 μm×02.5 mm×30 m），电离方式EI，离子源温度2.30 ℃，气化室温度2.60 ℃，接口温度2.70 ℃，程序升温（初始温度60 ℃，以每分钟20 ℃升温至1.40 ℃，保持5 min，再以4