实验三血红蛋白吸收及其衍生物光谱分析(终版2012-11-27)课件.pptVIP

3、血红蛋白（Hemoglobin，简称Hb） * * 实验三 血红蛋白及其衍生物 的吸收光谱测定 生物技术专业实验室 王小英 一、实验目的 1、熟悉Hb及其衍生物吸收光谱测定的原理及操作方法。 2、掌握吸收光谱曲线绘制的方法。 1、吸收光谱曲线：将各种波长（?）的单色光依次通过一定浓度的某一溶液，测量该溶液对各种单色光的吸收程度（吸光度A），以?为横坐标，以A为纵坐标，可得到一条曲线，即吸收光谱曲线或称为吸收曲线。 二、实验原理 2、吸收曲线的特点 ①同一种物质对不同波长光的吸光度不同。 吸光度最大处对应的波长称为最大吸收波长λmax 。 ②不同浓度的同一种物质，其吸收曲线形状相似λmax不变。而对于不同物质，它们的吸收曲线形状和λmax则不同。 ③在λmax处吸光度随浓度变化的幅度最大，所以测定最灵敏。吸收曲线是定量分析中选择入射光波长的重要依据。 血红蛋白四聚体结构模式 4、Hb及其衍生物 Hb + O2 HbO2 Hb + CO HbCO 吸收峰数量 峰 值 2个 541nm，576nm 2个 540nm，569nm 1个 540nm 1个 555n