实验九、十 酶联免疫吸附试验课件.pptVIP

实验九 酶联免疫吸附试验-ELISA实验十 IgG的分离和纯化 程 燕 2014年6月9日 实验九 酶联免疫吸附试（ Enzyme linked immunosorbent assay，ELISA） 实验目的 1.掌握酶联免疫吸附试验的原理、种类和用途。 2.学习用酶联免疫吸附试验双抗体夹心法检测乙型肝炎表面抗原（HBsAg）的方法。 3.了解HBsAg阳性的意义。 实验原理 用酶来标记抗原或抗体的免疫分析分析技术。由于酶的高效生物催化作用，产生了放大作用，使得原来极其微乎其微的抗原或抗体在数分钟后就可被识别出来，这种技术被称为酶联免疫吸附试验法。 实验原理 将已知抗体（或抗原）结合在某种固相载体上，并保持其免疫活性。 测定时将待检标本和酶标抗体（或酶标抗原）按不同步骤与固相载体表面吸附的抗体（或抗原）发生反应，用洗涤的方法分离抗原抗体复合物和游离物成分，然后加入底物显色，进行定性或定量测定。 实验原理 ELISA的基本原理有三条：? （1）抗原或抗体能以物理性（疏水性）地吸附于固相载体表面，并保持其免疫学活性； （2）抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物，而此种酶结合物仍能保持其免疫学和酶学活性； （3）酶结合物与相应抗原或抗体结合后，可根据加入底物的颜色反应