1-050517-标本的采集及处理操作规程.docVIP

标本采集及处理操作规程 目的 规范标本的采集、接收及保存等处理操作 适用范围 本操作规程适用于艾滋病病毒抗体检测标本管理 定义 3.1 用于艾滋病病毒抗体检测的标本指血清、血浆和全血，有时也包括唾液或尿液。本实验室一般用血清或血浆作为试验标本，采集血液部位一般为前臂肘静脉。 3.2 合格标本：用于病毒载量测定和淋巴细胞分类的抗凝血剂血要求至少2毫升以上，并在24小时之内送到本实验室；用于病毒载量测定的抗凝血剂要求用EDTA；用于抗体检测的血清或血浆至少在0.5毫升以上，无溶血或血脂过高、浑浊等。 责任 4．1 本科室的在职人员均有义务遵守中心首问负责制，接收本中心门诊和外单位送检的标本（包括初筛阳性标本），必要时给予采集血样 4．2 接收过程必须严格按相关的操作规程和实验室安全制度 操作步骤 5．1样品的采集 5.1.1 血清样品采集：用注射器抽出一定量静脉血，室温下自然放置1-2h，待血液凝固和血块收缩后再用3000r/m离心15min，吸出血清备用。 5.1.2 抗凝血样品采集：用加有抗凝剂的真空采血管或用消毒注射器抽取静脉血，转移至加有抗凝剂的试管，反复轻摇，分离血浆和血细胞备用。要求选用EDTA、或枸橼酸钠抗凝剂，以便同时进行病毒RNA和淋巴细胞分类检测。 5.1.3 采样注意事项 1) 采集样品应按临床采血技术规范及试剂盒说明书要求进行。 2) 采集样品时应注意安全，直接接触HIV感染者或艾滋病病人血液和体液的操作应戴双层手套。建议采用真空采血管及蝶形针具，以免直接接触血液。 5.2 样品的运送 5.2.1 实验室间传递的样品应为血清或血浆，除特殊情况外一般不运送全血。应按WHO提出的三级包装系统：样品应置于带盖的试管内，试管上应有明显的标记，标明样品的编号或受检者姓名、种类和采集时间。随样品应附有送检单，送检单应与样品分开，不能混放。第一层容器：装样品，贴标签，防渗漏。在试管的周围应垫有缓冲吸水材料，以免碰碎。将试管入专用带盖的容器内，容器的材料要易于消毒处理 第二层容器：耐受性好，防渗漏，容纳并保护第一层容器。可以装若干个第一层容器；第三层容器：放在一个运输用外层包装内，在第三层容器外面要贴标签（数量收、发件人）。 5.2.2 应在2-8℃条件下运送。用于抗体检测的样品可在48h内室温递送。每一包装的体积不得超过50ml。运送感染性材料必须有记录。 5.2.3 特殊情况下如需对个别样品进行复测，可以用特快专递形式投寄，但必须将盛样品的试管包扎好，避免使用玻璃容器，以保证不会破碎和溢漏。 5．3 样品的接收 5.3.1 含有感染性样品的包裹必须在具有处理感染源设备的实验室内由经过培训的工作人员打开，用后的包裹应进行消毒。 5.3.2 带手套，核对样品与送检单，检查样品管有无破损和溢漏。如发现溢漏应立即将尚存留的样品移出，对样品管和盛器消毒，同时报告有关领导和专家。 5.3.3 检查样品的状况，记录有无溶血、微生物污染、血脂过多以及黄疸等情况。血样量、抗凝剂等与检测项目是否相符，认真核对送检标本和送检化验单，确认无误后进行样品登记。对于不合格的标本，给予告知不合格之所在，需重新采血，以保证试验不受干扰。因特殊临床治疗导致自发荧光的样品不可用于荧光方法测试。 5.3.4 在收样登记本上详细登记收样人、日期、样品编号、姓名、性别、年龄、采样日期、样品种类、检验项目等相关内容，对于各地送检标本还必须登记送检单位。 检查标本是否合格，包括样品管是否破损、溢漏、严重溶血、细菌污染、血脂过多、 5．4 样品的保存 5．4. 1 用于抗体检测的血清或血浆样品,采集后应在室温下存放1小时后，再用1500rpm离心10分钟、备用。短期（1周）内进行检测的样品可存放于2-8℃，其他应进行分装后、存放于-20℃以下。冷冻的标本应待其完全融化后，充分摇匀，才能用于检测。5.3.2用于抗原和核酸检测的血浆和血细胞样品应冻存于-20℃以下，进行病毒 RNA检测的样品如保存3个月以上应置于-80℃。 5.4.2 对送检献血员或非献血员标本，应分离出血清或血浆，按1ml分装于1.5ml冻存管中，贴上标签，注明收样日期、姓名、S/CO、送检单位，分别置于献血员 或非献血员标本盒中，－20℃冻存，并登记在册。 标签范本： 检测程序详见“初筛阳性标本检测流程图” 5.4.3已确认HIV抗体阳性者标本，应分离出血清或血浆，按1ml分装于1.5ml冻存管中，贴上标签，注明收样日期、编号、姓名、送检单位、分装量置于阳性 标本盒中，如果标本量太多，可分装于10ml离心管中，－20℃冻存， 并登记表上详细登记姓名、发现日期编号、分装数量。 标签范本： 5.4.4哨点标本：应在三天内分离出所有血清，分装于1.5ml冻存管中，贴上标签，注