微生物检验作规程.docVIP

目的 对微生物检验过程进行控制，以确保微生物检验结果准确反映样品。 范围 适用于本公司啤酒生产过程中对微生物检验活动的全过程。 职责 技术质量处化验室化验员负责微生物检验的全过程，技术质量处归口管理。 操作规程 4.1 微生物检验玻璃器皿吸管的洗涤 4.1.1 一般的玻璃器皿（例如培养皿、试管、三角瓶等），可用毛刷及洗涤剂洗去灰尘、油垢，然后用自来水、蒸馏水充分冲洗，直至玻璃器皿内壁均匀分布一层薄的水膜，即器壁既不挂水珠也无条纹，即洗涤达到标准。 新购置的玻璃器皿用20%（m/m）的盐酸溶液浸泡数小时，再用自来水、蒸馏水充分洗涤，备用。 用过的玻璃器皿或含有营养琼脂培养基的器皿，可先用小刀或铁丝将器皿中的琼脂培养基刮去然后用水煮沸30分钟，再用自来水、蒸馏水冲洗干净，备用。 玻璃器皿内有污迹不能洗净时，可浸泡于铬酸洗液中，待器皿中有机物氧化分解后，取出用自来水、蒸馏水冲洗干净，备用。 用过的吸管用回形针钩出吸管上端棉花后，放水冲洗即可。 4.2 玻璃器皿、吸管的干燥 4.2.1 洗涤好的三角瓶、平皿倒放于洗涤架或桌子上自然晾干。 4.2.2 洗涤好的吸管顶端向下，下面垫一块干净的厚布或四层沙布，使吸管水份能迅速吸去后自然晾干。 4.3 玻璃器皿、吸管的包扎 4.3.1 三角瓶包扎前瓶口和试管口需先配套的塞好棉花塞或气塞，然后外面包一层牛皮纸，用线、绳扎好呈活结，灭菌后使用。 4.3.2 将干燥的培养皿用牛皮纸包扎好或盒装好，灭菌后使用。 4.3.3 将干燥后的吸管用一条宽约4～5cm的牛皮纸条，以45℃左右的角度螺旋形卷起来，吸管的坐端在头部，吸管的另一端用剩余纸条折叠打结，不使散平，标上容量后10支左右包扎成捆灭菌，使用时在无菌室从吸管中间拧断纸条抽取吸管。 4.4 玻璃器皿、吸管的灭菌 4.4.1 把包扎好需灭菌的物品放入高压灭菌锅内。 4.4.2 接通电源加热，待蒸汽排放3～5分钟后，放下排气阀开压。 4.4.3 高压灭菌锅压力到0.1MPa时，开始计时灭菌30分钟。。 4.4.4 关闭电源，自然冷却至压力降至0时，打开排气阀，将灭菌物品拿出放至105℃左右的烘箱内烘干备用。 4.5 无菌操作的准备工作及注意事项 4.5.1 无菌室应经常打扫、拖地板，用0.25%新洁尔灭，擦洗桌面及墙壁，用甲醛熏蒸无菌室。 4.5.2 无菌室使用前，应先打开紫外灯灭菌20-30min。 4.5.3 无菌室应备有专用开瓶器、镊子、接种针，每次使用前后应在酒精灯火焰上消毒。 4.5.4无菌室应备有75%酒精棉球；新洁尔灭消毒液和来苏消毒液（甲酚皂溶液与水1︰50混匀），内浸纱布数块，备用。 4.5.5进入无菌室穿好白大褂，换专用鞋，离室时脱去工作服和专用鞋，工作服和专用鞋只准在无菌室内使用，不准穿到其它地方去，并定期洗换和消毒灭菌。 4.5.6 样品检验前应在原始记录本上记录生产时间、批号、罐号等内容，并在所用平皿或试管上详细记录样品序号、检验日期、班次等内容。 4.5.7 无菌操作前，用75%的酒精棉球擦手。 4.5.8 检验操作过程不离开酒精灯无菌区，取下的塞子不得乱放。 4.5.9 吸取带菌液时，必须用加有橡皮吸头的吸管，切勿直接用嘴吸取，使用前吸管下端必须过火焰灭菌。 4.5.10 操作要正确迅速，所用的器皿均应是经过严格灭菌的器皿。 4.5.11 检验完毕，立即清理工作台，弃去不需要物品，打扫无菌室卫生。 4.6 微生物检验用药品配制 4.6.1 配制方法参见《过程、最终检验操作规程》药品配制。 4.6.2 所配制的培养基三角瓶上应注明配制日期、配制人等内容。 4.7 取样方法 4.7.1 大罐、清酒罐取样阀取样方法 （1）先从取样口放掉一些液体，关掉取样阀，然后于阀口内外用酒精（75%）擦/冲洗，然后关掉取样口。 （2）重新放一些液体，关掉取样阀后，点燃酒精灯，将取样口内外烧30秒左右，开启取样瓶盖在火焰下从取样口取样。 （3）取样瓶在瓶口和瓶盖经火焰灭菌后上盖封紧，关闭取样阀 4.7.2 大罐、清酒罐、过滤机、灌装机残水、自来水取样阀取样方法 （1）先从取样阀处放掉一点液体，阀内外用酒精棉球擦净。 （2）用火焰对取样阀进行灭菌。 （3）重新放掉一点液体冷却取样阀，启开取样瓶盖在火焰下取样。 （4）取样瓶在瓶口和瓶盖经火焰灭菌后上盖封紧，关闭取样阀。 4.7.3 空气、氮气等气体的取样方法 ⑴将气体阀打开，排空1分钟，逐渐将阀门关小。 ⑵以酒精棉球灼烧气体排放口，排气1～2分钟，再擦洗，再排放，如此重复3～4次。 ⑶在火焰旁打开已盛营养琼脂平皿的盖子，使气体直对着培养皿吹2～3分钟，取样品至培养皿间距离保持25㎝左右，盖上平皿，将其用牛皮纸包住后拿回化验室培养。 4.7.4 取样时注意问题： （1）所有的取样阀都有其优缺点，理想