2.细胞破碎与固液分离 ( 1 )细胞收集 常用离心分离的方法;膜过滤法也逐渐得到广泛应用。 ( 2 )细胞破碎 有机械破碎法和非机械破碎法。 ( 3 )固液分离 分离细胞碎片是比较困难的,可以用离心、膜过滤或双水相分配的方法,使细胞碎片分配在一相(通常为下相)而分离,同时也起部分纯化作用。 3.目的产物的分离纯化 分离纯化主要依赖色谱分离方法。色谱技术是下游精制阶段的常用手段,该法优点是具有多种多样的分离机制,设备简单,便于自动化控制和分离过程中无发热等有害效应。色谱技术分为离子交换色谱、疏水色谱、反相色谱、亲和色谱、凝胶过滤色谱、高压液相色谱等。 第二节 各类生物制品的分离纯化方法 蛋白质 核酸 糖类 脂类 氨基酸 2)亲和层析有如下特点(Characteristics of Affinity Chromatography) 纯化过程简单、迅速; 分离效率高; 产物纯度高; 必须针对某一分离对象制备专一的配基及寻求稳定的层析条件。 因此应用范围受到一定的限制。 8)载体、配基、目的物的连接(Conjunction of vector、ligand and target material) 载体(Vectors or Matrix) + 配基(Ligand) + 目的物(target material) Fig AC rel
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