细胞生物学-霍乱.pptVIP

霍乱毒素（choiera toxin） 徐娜 两种信号转导途径 一种是通过G蛋白偶联方式，即信号分子同表面受体结合后激活G蛋白，再由G蛋白激活效应物，效应物产生细胞内信号; 二种转导途径是结合的配体激活受体的酶活性，然后由激活的酶去激活产生细胞内信号的效应物. CT分子结构 CT作用机制 霍乱弧菌(Vibrio cholerae)感染人体后，产生一种毒素:霍乱毒素(cholera toxin，一种毒蛋白)，具有催化作用，可将NAD+上的ADP-核糖基团转移到Gsα亚基上， 使G蛋白核糖化(ADP-ribosylation)，这样抑制了α亚基的GTPase活性，从而抑制了GTP的水解，使Gs一直处于激活状态。其结果使腺苷酸环化酶处于永久活性状态，cAMP的形成失去控制，引起Na+和水分泌到肠腔导致严重腹泄。 CT进入细胞的过程 Receptor-Mediated Endocytosis 是大多数动物细胞通过网格蛋白有被小泡从外基质摄取大分子的有效途径，是一种选择性浓缩机制。流感病毒，ADIS病毒以及一些营养物质如VB，Fe的摄取，都是通过这一途径。 CT 通过CTB与肠道上皮细胞膜CMI受体结合后，被细胞内吞；经囊泡运输到达高尔基体，A与B分开，B留在高尔基体中随后降解；A从高尔基体运到内质网，进入到细胞质中，经蛋白酶切和二硫键还原，A1与A2分开，这是酶活化所必需的。随后，A1与ARF 结合具有了催化能力。A1先把NAD 水解为烟酰胺和ADP-核糖，再把ADP-核糖转给Gsα的重要活性部位Arg201，使α丧失GTPase活性 CTB应用 1.载体蛋白 作为免疫载体的应用受到广泛的重视，它是CT的无毒单位，具有结合CMI的功能，可使毒性亚单位A1紧密结合在肠道黏膜细胞表面，使融合蛋白更易与消化道黏膜作用，进而引起一系列生理生化反应，产生更强的免疫效果。作为某些外源多肽的稳定载体，当它与化学偶联或基因融合的抗原同时进入体内之后，会激起融合表位抗原的免疫原性，使机体产生强烈的免疫反应，有可能达到免疫保护作用. 2.肽疫苗 是新一代疫苗，以其不含无用成分、安全无不良反应而受到研究者们的重视。由于合成肽分子量小，所含抗原决定簇数量少，因此免疫原性差，不能刺激机体产生较强的保护性免疫效应以抵抗病原体感染。现在一般通过形成环肽、和载体蛋白交联以及使抗原决定簇基因与载体蛋白基因融合表达等方法提高肽疫苗的免疫原性。CTB无毒性，具有很强的免疫原性，能刺激产生黏膜IgA和血清IgG抗体，具有能加强抗原表位的抗原性的特点，故B亚单位基因常被选作肽疫苗的佐剂。 3.口服及鼻内免疫蛋白 口服疫苗已成为许多流行疾病预防研究中的一个重要组成部分，尤其是某些只通过肠道免疫产生的分泌性IgA才能清除已感染病菌的疾病（如幽门螺杆菌感染引起的胃溃疡等疾病），口服疫苗的研究更显重要。CTB蛋白是用于疫苗口服的一种理想蛋白质，因为它不仅可以提高肠道对蛋白质的吸收率，而且可作为免疫佐剂，提高机体产生的抗体效价。CTB还是很好的鼻黏膜免疫剂，当以鼻内途径免疫时它不仅可以引起黏膜免疫产生分泌型抗体，同时诱导出血清抗体，产生较强的系统免疫应答。 * * * * *