P物质及其受体NK-1在非小细胞肺癌中的表达及作用.docVIP

青岛大学 硕士学位论文 P物质及其受体NK--1在非小细胞肺癌中的表达及作用 姓名：王冠群 申请学位级别：硕士 专业：病理学与病理生理学 指导教师：陈桦  肺癌????橹?叭朔蜗侔┫赴?礎??赴?抵械谋泶锾氐恪＂谘芯縉??特异 常肺组织有少许表达于细胞浆内。③在??细胞系中?镏屎蚇??呈阳性表 达。表达部位与组织相符。发现加入?? ??细胞系的增殖，其中浓度为?。?时抑制增殖作用最明显；??同????  关键词：?镏剩簧窬?る囊?；肺肿瘤；????  ???? ????? ??? ? ? ????? ????????????????? ???????????????．②? ???? ??? ? ? ?????? ? ???? ??? ????? ?????? ?? ? ? ????? ? ???琧??????????????琣?????? ? ???????．②? ????????? ? ? ??????? ? ?? ?????? ? ???? ???? ? ? ? ? ????? ?? ? ????? ?????甌? ???? ? ? ? ????；?????? ??? ? ??????? ?? ??? ??? ??????? ? ?????? ?? ???甌? ??? ????? ? ?? ??????? ?? ?? ? ? ? ???瑃? ? ?? ???產? ? ?? ? ?? ??? ??? ?? ?? ????? ?? ???? ? ? ? ??? ? ? ?  ??? ?? ?? ?? ?? ?? ? ?? ????? ? ? ? ????????甌? ? ????? ? ??? ??????  够抑制体内和体外培养的小细胞肺癌细胞系，并且与?镏剩疦??芴逵忻芮泄叵祅引．  青岛大学硕士学位论文  第一章实验材料及试剂 第一章 ??????细胞肺癌组织标本及细胞系 实验所需非小细胞肺癌组织取自青岛市市立医院东院区??年和??年外科 取对癌旁组织???标本?例； 对照选取解剖标本中相对正常肺组织?例。 ??主要试剂 ??每谷薖物质多克隆抗体工作液?????：北京中杉金桥生物公司产品。 ?????????广谱试剂盒?????：福州迈新公司产品，即用型，包括 ??????甆????：英国???公司产品，冻存 ??????悍↖雪???．????瓹???甅???公司赠品，冻存于．??，使用 时用含?％胎牛血清的??疭／??嘌?合∈臀O嘤εǘ龋??顺????保存备  ?．谷氨酰胺，使用时 ??????：美?㏒??公司产品，使用时用??磆??配制， ?℃避光保存。 ??磷酸盐缓冲液?????．???? 物公司产品，使用时用三蒸水配制成浓度为???的溶液，?值为??．??，高压灭 ???????．??，三 ??甲醛、乙醇及丙酮：烟台三合化学试剂有限公司产品。  酸后去离子水冲洗，高压灭菌后电热干燥箱内烘干备用。 ???扛龉?艘禾? ??淮涡??塑料吸管：上海钰森生物技术有限公司产品。 ??主要仪器设备 ??⒐鶶??????? ????石蜡包埋机。 ??鹿鶯?????全自动石蜡切片机。 ??毡綩??? ??毡綨???．?倒置相差显微镜。 ??????型双人单面净化工作台?站患?虐蔡┘际跤邢薰??。 ??拦鶥??? ? ??美国? ??电热鼓风恒温干燥箱?蕉?ǚ灰搅破餍倒??。  第二章实验方法及项目 第二章实验方法及项目 ??非小细胞肺癌的组织学研究 ? ???椅路跤?小时， ? ? ? ? 中性树胶封片。 ?。?捎妹庖咦榛疎????两步法在石蜡进行染色。主要步骤如下：蜡块连  青岛大学硕士学位论文 ? ? 源性过氧化物酶，室温孵育???琍?冲洗三次每次??，滴加正常山羊封闭血清 ??瓒戏翘匾煨越岷衔坏悖?跤???，甩去血清，加一抗? ? ? 或者种板?职迩凹扑阆赴?芏?。种?篺?迨保?靠紫赴???．???个；种?孔  第二章实验方法及项目 ? 洗三次每次??，加入一抗????跤?小时，??逑慈?蚊看????覣试剂 ? 染??蟪逅??荻染凭??％，?％，???脱水三次每次??，二甲苯透明三次每 ????用含?％胎牛血清的??疭／??∈统上嘤εǘ龋琒???个浓度梯度 殖的影响；最后测定两种药物合用对??细胞增殖的影响。 测定影响细胞增殖的最佳药物浓度时，对数生长期加不同浓度的药物，作用? 后，再分别加入不同浓度的  青岛大学硕士学位论文 步骤如下： ? ? 具体步骤：取对数生长期的细胞，按???／?以??寤?又钟?孔板内，待 养；培养结束前?????锨澹?挎軱／?入罗丹明??张ǘ任?? ?，吹打制成单 ? 细