第16章.同位素示踪在植物病理学研究中的应用课件.pptVIP

3）AFLP（amplification fragment length polymorphism 扩增片段长度多态性） 该方法的基本原理是对基因组DNA的限制性内切酶的酶切片段进行选择性扩增。限制性内切片段与互补粘性末端双链通用人工接头连接，连接后的粘性末端顺序作为以后PCR引物的结合位点,实践中根据需要在引物3’端可分别加入1～3个选择性核苷，以达到选择性扩增的目的。通过标记引入物，?自显影仅显视选择扩增的片段。AFLP 结合了RAPD和RFLP 的优点，具有RFLP技术的可靠和PCR技术的高效性，可在一个反应内检测大量的限制片段，一次可获得50～100条谱带。 AFLP对DNA的纯度和内切酶质要求较高。 4）SSR （micro satellite 微卫星） 指分散在真核生物基因组序列中的2-4个碱基组成的简单重复序列，如（GA）n（GAA）n等。个体间简单重复序列数目的变化产生的多态性，比RFLP多态性高得多，被认为是继RFLP的第二代分子标记，其不足是必须针对每个染色体上的微卫星，发现其两端的单拷贝序列，据此设计引物，这给SSR标记带来方便，尚需进行进一步研究。 5.2 分子标记的 应用 1）分子标记遗传连锁图谱的构建 分子标记图谱是基因定位的基础，标记密度达到0.1cm 时，可直接对基因定位。图谱构建以同源染色体基因交换重组为