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选择培养基 加入青霉素的培养基 加入高浓度食盐的培养基 不加氮源的无氮培养基 不加含碳有机物的无碳培养基 练习 1.不能作为异养微生物碳源的是( ) A.牛肉膏 B.含碳有机物 C.石油 D.含碳无机物 2.自养型微生物与异养型微生物的培养基的主要差别是( ) A.碳源 B.氮源 C.无机盐 D.生长因子 3.下列关于生长因子的说法中,不正确的一项是 ( ) A.是微生物生长不可缺少的微量有机物 B.是微生物生长不可缺少的微量矿质元素 C.主要包括维生素、氨基酸和碱基等 D.一般是酶和核酸的组成成分 思考: 1. 获得纯净培养物的关键? 2. 无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外,还有什么目的?(P15旁栏思考) 3. 消毒和灭菌有何不同? 4. 常用的消毒和灭菌方法有哪些? (2)灭菌 a 灼烧灭菌 b 干热灭菌 c 高压蒸汽灭菌 二 实验操作 (一)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 二 实验操作 (一)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 计算 称量 溶化 灭菌 倒平板 二 实验操作 (一)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 称量 溶化 灭菌 倒平板 ①溶化时为什么要将牛肉膏连同称量纸一 起加热? 计算 二 实验操作 (一)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 称量 溶化 灭菌 倒平板 ①溶化时为什么要将牛肉膏连同称量纸一 起加热? 可保证粘附在称量纸上的牛肉膏也能溶于 水中,减少误差。 计算 二 实验操作 (一)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 称量 溶化 灭菌 倒平板 ②加琼脂的目的是什么? 计算 二 实验操作 (一)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 称量 溶化 灭菌 倒平板 ②加琼脂的目的是什么? 作为凝固剂 计算 二 实验操作 (一)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 称量 溶化 灭菌 倒平板 ③在灭菌前, 用牛皮纸、旧报纸包紧盛有 培养基的锥形瓶的目的是什么? 计算 二 实验操作 (一)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 称量 溶化 灭菌 倒平板 ③在灭菌前, 用牛皮纸、旧报纸包紧盛有 培养基的锥形瓶的目的是什么? 在灭菌时能避免水蒸汽凝结时浸湿棉塞, 在取出培养基锥形瓶时也起到隔绝空气中 杂菌污染的作用。 计算 二 实验操作 (一)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 称量 溶化 灭菌 倒平板 ④培养皿能否用高压蒸汽灭菌? 计算 二 实验操作 (一)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 称量 溶化 灭菌 倒平板 ④培养皿能否用高压蒸汽灭菌? 不能,因为培养皿要保持干燥,应该用 干热灭菌。 计算 倒平板 1.培养基灭菌后,需要冷却到50 ℃左右时,才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度? 答:可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶,感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时,就可以进行倒平板了。 2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰? 答:通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基。 讨论: 3.平板冷凝后,为什么要将平板倒置? 4.在倒平板的过程中,如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平板还能用来培养微生物吗?为什么? 答:平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,凝固后的培养基表面的湿度也比较高,将平板倒置,既可以使培养基表面的水分更好地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。 答:空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生,因此最好不要用这个平板培养微生物。 练习 2.下列操作与无菌技术无关的是 A 接种前用肥皂洗双手,再用酒精擦拭双手 B 接种前用火焰烧灼接种针 C 培养在50℃左右时搁置斜面 D 在酒精灯的火焰旁完成 练习 3.外科手术器械和罐头食品的处理,要以能 够杀死什么为标准 A 球菌 B 杆菌 C 螺旋菌 D 芽孢 练习 3.外科手术器械和罐头食品的处理,要以能 够杀死什么为标准 A 球菌 B 杆菌 C 螺旋菌 D 芽孢 ㈡.纯化大肠杆菌 平板划线法和稀释涂布平板法。 微生物的接种的常用接种方法有: 1.平板划线的操作方法 平板划线的操作 一旦划破,会造成划线不均匀,难以达到分离单菌落的目的; 二是存留在划破处的单个细胞无法形成规则的菌落,菌落会沿着划破处生长,会形成一个条状的菌落。 * 到目前为止, 几十项Nobel生理学和医学奖,化学奖 都与微生物学有关 ㈠.微生物的类群 微生物 原核类: 真核类 非细胞类: 细菌、支原体、放线菌、蓝藻 个体微小、结
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