09 细菌感染的检查方法与防治原则课件.ppt

第二节 病毒学诊断 病毒的分离与鉴定 细胞培养 原代细胞：原胚肾细胞 二倍体细胞：人胚肺WI-26株细胞 传代细胞：癌细胞 第二节 病毒学诊断 病毒的分离与鉴定 细胞培养 病毒在细胞中增殖的指标： 细胞病变效应-cytopathic effect, CPE 红细胞吸附现象-hemadsorption，HAd 干扰现象-interference 第二节 病毒学诊断 病毒的分离与鉴定 细胞培养 细胞病变效应-cytopathic effect, CPE 有些病毒在细胞内增殖时可引起特有的细胞病变，称为细胞病变效应 (CPE)。常见的变化有细胞变圆、聚集、坏死、溶解或脱落等。 有些病毒如麻疹病毒、CMV、RSV等 作用于细胞膜，可使邻近的细胞相互融合，形成多核巨细胞或称融合细胞。 有些病毒 (如狂犬病病毒、麻疹病毒等) 可在培养细胞中形成胞浆或核内的包涵体。 第二节 病毒学诊断 病毒的分离与鉴定 细胞培养 细胞病变效应-cytopathic effect, CPE 第二节 病毒学诊断 病毒的分离与鉴定 细胞培养 细胞病变效应-cytopathic effect, CPE 第二节 病毒学诊断 病毒的分离与鉴定 细胞培养 红细胞吸附现象-hemadsorption,HAd 流感或副流感病毒等感染细胞后，由于细胞膜上出现了血凝素，具有吸附脊椎动物 (豚鼠、鸡、猴等) 红细胞的能力，这一现象称红细胞吸附； 常用来测定具有HA的粘病毒与副粘病毒的增殖； 若有相应的抗血清，则能中和细胞膜上的HA，HAd不再发生，称红细胞吸附抑制试验。 第二节 病毒学诊断 病毒的分离与鉴定 细胞培养 干扰现象-interference 某些病毒感染细胞时不出现CPE或其他易于测出的变化(如HAd)， 但能干扰在其后感染的另一病毒的增殖。 如风疹病毒感染Vero细胞时CPE不明显，但它能干扰后感染的埃可病毒的增殖，从而阻抑后者所特有的CPE。 第二节 病毒学诊断 病毒感染的血清学诊断 原列情况需要进行血清学检查： 采集标本中分离病毒已很困难； 目前尚未建立分离该病毒的方法和技术； 判断临床治疗效果； 进行流行病学调查； 基层医疗机构无法开展病毒分离实验。 第二节 病毒学诊断 病毒感染的血清学诊断 原理：是用已知病毒抗原来检测病人血清中有无相应抗体，故须待病人感染后体内产生抗体时才能检出。 另外，在采取临床标本及病人血清应注意病程，必须采取患者急性期血清与恢复期血清 (双份血清) 进行血清学试验。 若第2次血清抗体滴度比第1次高出4倍以上时，才有诊断意义。 第二节 病毒学诊断 病毒感染的血清学诊断 中和试验(neutralizing test, NT test) 补体结合试验 (complement fixation test,CF test) 血凝抑制试验(hemagglutinatia inhibition test, HI test) 凝胶免疫扩散试验 第二节 病毒学诊断 病毒感染的血清学诊断 中和试验(neutralizing test, NT test) 是病毒在活体内或细胞培养中被特异性抗体中和而失去感染性的一种试验。 中和抗体(netralizing antibodies,NTAb)是作用于病毒表面抗原 (衣壳或包膜) 的抗体，同种不同型病毒间一般无交叉，特异性高，抗体在体内维持时间长。 中和抗体阳性不一定表示正在感染中，也可能因以前有过隐性感染所致。 中和试验适用于病毒疫苗研究和人群免疫情况调查，在临床诊断上较少使用。 第二节 病毒学诊断 病毒感染的血清学诊断 补体结合试验 (complement fixation test,CF test) 用已知病毒可溶性补体抗原(CF)来检测病人血清中相应(CF)抗体。 CF抗原是病毒的内部抗原，同种异型间常有交叉，故特异性较中和试验低。 但CF抗体（IgM）出现较早，消失较快，故CF阳性可作为近期感染的指标。 第二节 病毒学诊断 病毒感染的血清学诊断 血凝抑制试验(hemagglutinatia inhibition test, HI test) 具有HA的病毒能凝集鸡、豚鼠、人等的红细胞，称血凝现象。 这种现象能被相应抗体抑制，称HI试验。