实验五 小鼠初级精母细胞染色体畸变试验 2009.12.01课件.pptVIP

实验五 小鼠初级精母细胞染色体畸变试验 目的 本试验是一项检测生殖细胞染色体畸变效应试验，利用细胞遗传学方法，检测整体哺乳动物初级精母细胞染色体畸变，以评价受试样品引起生殖细胞可遗传突变的可能性。 学习小鼠初级精母细胞染色体畸变试验方法的基本操作步骤。 原 理 不同发育阶段的雄性生殖细胞对化学物质的敏感性不同，初级精母细胞对化学诱变剂较敏感。多数情况下，化学诱变剂诱发染色体畸变必须经过DNA复制期。哺乳动物精子发生过程中，DNA合成是在初级精母细胞细线期以前的各阶段细胞中进行，以后孵育的细胞不再进行DNA合成，故受试物需在前细线期给予。于小鼠第一次接触受试物后的第12～14天采样制片，可观察到前细线期接触引起的精母细胞染色体畸变效应。 仪器和器械 生物显微镜、离心机、解剖剪、眼科镊子、注射器、灌胃针头、小平皿、离心管、吸管、滴管、试管架、载玻片、玻璃染色缸、擦镜纸等。 试剂 姬姆萨（Giemsa）染液??  Giemsa染料?????????????3.8 g  甲醇??????????????????????? 375 ml 甘油??????????????????????? 125 ml 配制：将Giemsa染料和少量甲醇于乳钵里仔细研磨，再加入甲醇至375 ml，待完全溶解后，再加入125ml甘油，混合均匀。置37℃恒温箱中保温48h。