第十一章 分离与富集课件.ppt

第十一章 分离与富集 分离效果 常用分离方法 11-2 沉淀分离法 ——依据溶度积分步沉淀原理 沉淀分离法: 在样品溶液中加入沉淀剂,依据溶度积原理，通过沉淀反应，有选择地沉淀某些离子，而与其它离子分离开来的方法。 共沉淀分离:利用共沉淀现象，以某种沉淀作载体，将痕量组分定量地沉淀下来，溶解在少量溶剂中，达到分离与富集的目的。 连续萃取法 Lower-density solvent extraction 7.萃取分离技术的发展 固相萃取 ——液固萃取 ９.4.1 离子交换树脂/离子交换剂 聚苯乙烯磺酸型阳离子交换树脂 交换反应 离子交换树脂的性能参数 离子交换树脂的性能参数 交换容量的测定 交换过程与总交换量 exchange capacity ９.4.2. 离子交换亲合力 affinity 微量组分的富集 11-5 色谱分离法 色谱分离法的分类（原理） 色谱分离法的分类（支撑体形状） Stationary phase Adsorption Partition Gel Filtration (Molecular exclusion) Affinity Antigen and antibody reactive Caffine MIP (molecular imprinted polymer) Ion exchange 柱色谱 纸色谱 paper chromatography 保留值——比移值 Rf 保留值——相对比移值 薄层色谱 TLC Thin-layer chromatography TLC定量测定（面积积分） Two-dimension HPTLC High-performance thin layer chromatography TLC diode array scanner 本章要点 Ag Ag Ag Ab Ab Ab Ab Ag Ab Ab Ab Ab Ag P Ag Ag P P P P Ag P caffine Chin I. Lin et al, Anal. Chim. Acta, 481(2003) 175-180 Description 聚甲酰胺-乙烯三乙氧硅烷 SO3- SO3- SO3- SO3- SO3- SO3- SO3- SO3- SO3- SO3- SO3- H+ H+ H+ H+ H+ H+ H+ H+ H+ H+ H+ M+ M+ M+ M+ M+ Cl- 以吸附柱色谱为例进行讨论 固定相，如Al2O3，装柱 柱顶倾入样品(A, B) 顶部加入洗脱剂（流动相） 物质A 物质B A、B两组分随流动相的流动而向下移动。A、B在两相不断进行着的溶解、吸附、再溶解、再吸附过程中，由于在两相吸附能力的差异，达到分离。 以分配色谱为例进行讨论 取一大小适宜的滤纸条 在滤纸条的下端点上标准和样品 放在色谱筒中展开 取出，标记前沿， 凉干 着色，分析 固定相 滤纸上的H2O 流动相 展开剂 l 标准 样品 将标准和样品的 Rf 值进行比较，可以对样品进行定性分析 Rf = 0 ~ 1 Rf = 0 ，表明在原点不动 Rf = 1，表明随溶剂一起移动 B b a A 定性分析 定量分析 截取洗脱 扫描 CCD摄像 参比 样品 B l b a 用涂有固定相的薄层板代替滤纸进行分离分析 支撑体 铝板，塑料板，玻璃板等 固定相 硅胶，氧化铝，聚酰胺等 分离原理 吸附色谱、分配色谱等 流动相 各种配比的溶剂 定性分析 比移值、相对比移值等 定量分析 截取后洗脱 斑点扫描 薄层色谱和纸色谱 滤纸 玻璃片 载体 展开剂 展开剂 流动相 滤纸上的水 吸附剂(硅胶, Al2O3, 纤维素) 固定相 纸色谱 薄层色谱 比移值: 样品点中心到原点距离(a)与溶剂前沿到原点距离(b)的比值。 Rf = a/b = h/c 数字图像处理及数据处理 横向，纵向扫描，得到每个光斑的总亮度值，做出曲线 同时可导出数据，也可以其它软件中进行再处理 摘自陈浩的报告 C/M/NH3 95:5:0.8→ ?C/A/M/HAc/H2O 8:1.5:0.25:0.25:0.2 7 8 6 5 3 4 2 1 C CHCl3, M CH3OH, A CH3COCH3 Steroids 类固醇 1 progesterone 2 11-deoxycorticosterone 3 11-dehydrocorticosterone 4 estrone 5 estrasiol 6 11-deoxycortisol 7 hydrocortisone 8 corticosterone TLC 2010二极管阵列薄层色谱扫描仪 1、对分离效果的评价：