微生物实验报告.docVIP

微生物在物质转化中的作用 1.1 微生物可降解纤维素的实验设计 1.1.1 实验目的 纤维素（cellulose）是由葡萄糖组成的大分子多糖。不溶于水及一般有机溶剂。是植物细胞壁的主要成分。纤维素是自然界中分布最广、含量最多的一种多糖，占植物界碳含量的50%以上。一般的微生物难以降解纤维素。为证明存在能使纤维素降解的微生物，故设计本实验。 1.1.2 实验原理 有些细菌具有分解纤维素的能力，可以分泌纤维素酶，使纤维素水解。测定细菌对纤维素的水解常采用纤维滤纸，通过液体培养或固体培养进行试验。经过培养后的滤纸条被分解发生断裂或失去原有物理性状，从而可以判断细菌能否分解纤维素。 1.1.3 实验药品和仪器 样品：新鲜土样 无机盐基础培养基：硝酸铵1.0g、氯化钙0.1g、磷酸氢二钾0.5g、氯化铁0.02g、磷酸二氢钾0.5g、酵母膏0.05g、七水合硫酸镁0.5g、氯化钠1.0g、水1000ml，pH7.0~7.2 （固体培养基需加琼脂2%） 仪器：平皿、接种环、中性滤纸、试管、灭菌锅、无菌操作台、烧杯、锥形瓶 1.1.4 实验步骤 a好氧培养法 ⑴将无机盐基础培养倒平板，在固体培养皿上铺上滤纸，需要对照试验： ⑵接种后的培养基和没接种的空白样都放入35～37℃条件下培养10～15天； ⑶取出试管观察培养液中滤纸有无被分解而透空的地方。 b厌氧法 ⑴将无机盐基础培养基分装试管，在培养基中浸泡一条5～7cm优质滤纸，需要对照试验： ⑵接种后的培养基和没接种的空白样都放入35～37℃条件下培养10～15天； ⑶取出试管观察培养液中滤纸有无被分解而透空的地方。 1.1.5实验现象与结果分析 a好氧培养法实验现象 c实验结果分析 根据实验结果，可以得出以下结论： （1）两种方法下滤纸都被腐蚀，说明无论是好氧还是厌氧条件下，都存在可以降解纤维素的微生物。由因为采集的土样地点较集中（我参加了取样工作），由此推测该微生物很有可能是兼性菌。 （2）好氧法中的滤纸远比厌氧法的腐蚀得更严重，说明在好氧条件下，纤维素降解微生物生长更旺盛。这可能是由微生物本身性质和环境条件（特别是氧气含量）决定的。 1.2 生物对氨氮有生物催化作用的实验设计 1.2.1实验目的 证明存在能将NH4+转化成NO2-和NO3的微生物 1.2.2实验原理 有HNO2产生时，加格里斯试剂A液和B液出现绛红色，如果有硝酸存在时，加入二苯胺试剂则出现蓝色。 1.2.3实验器材及试剂 a实验试剂 硝化作用培养基：0.2%(NH4)2SO4、0.1%K2HPO4、0.05%MgSO4·7H2O、0.2%NaCl、0.04%FeSO4、0.5%CaCO3，120℃灭菌30min. 格里斯试剂： A液：0.5g对氨基苯磺酸溶于150mL10%醋酸溶液中，保存于棕色瓶中 B液：α-萘胺0.1g、蒸馏水20ml、10%稀醋酸150ml,保存于棕色瓶内。 二苯胺试剂：0.1g二苯胺溶于20ml蒸馏水中，然后缓缓加入100ml浓硫酸，保存于棕色瓶子中。 b实验仪器 三角瓶、培养箱、电子秤、比色碟、试管、滴管、超净台、高压灭菌锅 1.2.4实验步骤 ⑴取样：取1g左右样品土壤接于硝化作用培养基的三角瓶中； ⑵放入28～30℃培养箱中培养7～17天 ⑶检查结果 取培养液于试管中，加格里斯试剂A液与B液各数滴，观察样品的颜色变化，并记录。 若上述现象都有了，则说明有微生物能将NH4+转化成NO2-和NO3- 1.2.5实验现象与结果分析讨论 a实验现象 加A液 加B液 加A液 加B液 b实验结果分析 格里斯试剂A液和B液加入样品后，只有加入B液的样品出现绛红色，说明了溶液产生了HNO2，可反推出存在能将NH4+转化成NO2-的微生物。而加入二苯胺试剂的样品都没有出现预期效果，不能说明是否存在能将NH4+转化成NO3-的微生物，只能说明操作不当，实验失败。 1.3聚磷菌蓄磷 1.3.1实验目的与要求 ⑴ 1.3.2实验原理 微生物除磷的原理主要是用聚磷菌在厌氧—好氧过程中，聚磷菌在厌氧池中为优势菌种，构成了活性污泥絮体的主体并吸收低分子的有机物，同时将贮存在细胞中聚合磷酸盐（Poly-p）中的磷通过水解而释放出来，并提供必需的能量。而在随后的好氧池中，聚磷菌所吸收的有机物将被氧化分解，并提供能量，同时能从污水中变本加厉地、过量地摄取磷，在数量上远远超过其细胞合成所需的磷量，将磷以聚合磷酸盐的形式储藏在菌体内而形成高磷污泥，并且通过剩余污泥系统排出，因而可获得相当好的除磷除果。 1.3.3 实验器材及试剂 a培养基配方 废水合成培养基：葡萄糖0.3g/L；无水乙酸钠0.15 g/L