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专题二课题3 分解纤维素的微生物的分离
纤维素与纤维素酶及纤维素分解菌的筛选
纤维素
1、化学组成:由 元素→ →
2、分布:纤维素是地球上含量最丰富的 类物质, 是自然界中纤维素含量最高的天然产物,此外,木材、作物等也富含纤维素。
3、种类:天然维生素、商品维生素(水溶性的 ,水不溶性的 )
(二)纤维素酶
1、组成:纤维素酶是一种 ,包括三种成分,即
2、作用
纤维素 ( ) 纤维二糖( )葡糖糖
3实验验证:
试管 滤纸条 缓冲液PH=8 纤维素酶 条件 结果 实验组 1cm × 6cm 10ml ml 试管置于锥形瓶中并在摇床上震荡反应1h 完全分解 对照组 1cm × 6cm
ml.
﹨
基本无变化 纤维素分解菌的筛选:
原理: 纤维素酶
刚果红+ 培养基中会出现以 为中心的
2、方法: 染色法
二、实验设计
(一)实验设计流程
1、土壤取样:选择富含 的环境
↓
2、选择培养:(1) 目的: ,确保能够从样品中分离所需的
(2)操作方法:将土样加入装有30ml 的锥形瓶中,将锥形瓶固定在
上,一定温度下震荡培养1—2d ,直至培养液变 ,也可重复选择培养。
↓
梯度稀释
↓
4、涂布培养:将样品涂布到 的培养基上
↓
5、筛选菌株: 染色法,挑选产生 的菌落
比较项目 方法一 方法二 区别 ,进行颜色反应
优点 显示出的颜色基本是
的作用
操作简单,不存在菌落混杂 缺点 操作 ,加入刚果红会使
发生混杂 ①培养基中含有淀粉的等物质,够产生 的微生物出现假阳性反应②有些微生物长时间培养会 ,从而形成明显的
课题延伸—纤维素分解菌的鉴定
1、为确定得到的透明圈的菌落是纤维素分解菌,需要进行发酵产 的实验,纤维素酶的发酵方法 和 两种
2、纤维素酶的测定方法,一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后产生的 进行 测定。
纤维素分解菌筛选过程中两种培养基的比较
选择培养基 鉴别培养基 物理性质 目的用途 能生长的微生物
课题3 分解纤维素的微生物的分离
纤维素与纤维素酶及纤维素分解菌的筛选
纤维素
1、C、H、O 葡萄糖 纤维素
2、多糖 棉花
(二)1、复合酶 C1酶 、 Cx酶和葡萄糖苷酶
2、C1酶 、 Cx酶 葡萄糖苷酶
3、1ml 11ml
(三)1、纤维素 红色复合物 纤维素分解菌 透明圈
2、刚果红
二、实验设计
(一)1、纤维素 2、增加纤维素分解菌的浓度 选择培养基 浑浊
4、鉴别纤维素分解菌 5、刚果红 透明圈 先培养微生物,再加入刚果红
淀粉酶 假阳性 降解色素 透明圈
三、1、纤维素酶 液体发酵和固体发酵
2、葡萄糖
纤维素分解菌筛选过程中两种培养基的比较
选择培养基 鉴别培养基 物理性质 液体 固体 目的用途 能使营养成分充分消耗,以增加纤维素分解菌的浓度 在培养基上形成肉眼可见的菌落 能生长的微生物 以纤维素作为碳源和能源的微生物才可以生长 大部分微生物都可以正常生长
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