肝功能中各检测项目的测定方法.doc

肝功能中各检测项目的测定方法、测定原理和临床意义 血清总胆汁酸TBA： 测定方法：A、酶循环法，B、3a-HDS法（3-a羟类固醇脱氧酶） 测定原理 方法A：胆汁酸被3α羟基类固醇脱氢酶（3a-HSDH）及口-硫代烟酰胺嘌呤二核苷酸氧化型特异性的氧化，生成3酮类固醇及}硫代烟酰胺嘌呤二核苷酸还原型。此外，生成的3酮类固醇在3α羟基类固醇脱氢酶及β硫代烟酰胺嘌呤二核苷酸还原型存在下，生成胆汁酸及β烟酰胺嘌呤二核苷酸氧化型。以上依据循环酶而放大量的胆汁酸测定生成的β-硫代烟酰胺嘌呤二核苷酸还原型的吸光度，计算血清中胆汁酸的量。 方法B：在3-a羟类固醇脱氧酶作用下，各种胆汁酸C3上α位的羟基脱氧形成羰基，同时氧化型NAD还原成NADH随后NADH上的氢由黄递酶催化转移给硝基四氮唑蓝（NTB）产生甲替,用磷酸中止反应,甲替的产量与总胆汁酸成正比，在波长540nm比色,与同样处理的标准品比较，计算其含量。 （3）临床意义 1.测定血清中胆汁酸可提供肝胆系统是否正常，肝、胆疾病时周围血循环中的胆汁酸水平明显升高。急性肝炎早期和肝外阻塞性黄疸时可增至正常值的100 倍以上。对肝胆系统疾病的诊断具有特异性。 2．可敏感地反映肝胆系统疾病的病变过程。肝胆疾病时血清胆汁酸浓度的升高与其他肝功能试验及肝组织学变化极为吻合，在肝细胞仅有轻微坏死时，血清胆汁酸的升高，常比其他检查更为灵敏。据报道，急性肝炎、肝硬化、原发性肝癌、急性肝内胆汁郁滞、原发性胆汁性肝硬化以及肝外阻塞性黄疸，其血清胆汁酸均100 ％出现异常。上述疾病时均有血清胆汁酸含量的增高。 丙氨酸氨基转移酶ALT 测定方法：酶偶联法，赖氏法，连续监测法 测定原理：L-丙氨酸?+?α-酮戊二酸---ALT----L-丙酮酸?+?L-谷氨酸? 丙酮酸?+NADH+H+---------LD-------L--乳酸+NAD+ （3）临床意义： 谷丙转氨酶升高临床意义就在于对急性乙型肝炎、慢性肝炎、HBV携带者、重型肝炎以及肝硬化、肝癌等一系列病毒性肝炎的诊断和分析，ALT的升高只表示肝脏可能受到了损害。除了肝炎，其他很多疾病都能引起谷丙转氨酶转氨酶升高。 在急性肝炎及慢性肝炎与肝硬化活动，肝细胞膜的通透性改变，谷丙转氨酶就从细胞内溢出到循环血液中去，这样抽血检查结果就偏高，转氨酶反映肝细胞损害程度。但谷丙转氨酶缺乏特异性，有多种原因能造成肝细胞膜通透性的改变，如：疲劳、饮酒、感冒甚至情绪因素等等。上述原因造成的转氨酶增高一般不会高于60个单位，转氨酶值高于80个单位就有诊断价值，需到医院就诊。另外需要注意，谷丙转氨酶活性变化与肝脏病理组织改变缺乏一致性，有的严重肝损患者谷丙转氨酶并不升高。因此肝功能损害需要综合其他情况来判断。 天门冬氨酸氨基转移酶(AST) 测定方法：酶偶联法 测定原理： （3）临床意义：天冬氨酸氨基转移酶在心肌细胞中含量最高，但肝脏损害时也可使其血清浓度升高，临床常作为心肌梗死和心肌炎的辅助检查。天冬氨酸氨基转移酶(AST)的正常值为0~40U/L，当丙氨酸氨基转移酶(ALT)明显升高，(ALT/AST)比值大于l时，就表示肝脏发生了实质性损害。 四、碱性磷酸酶ALP （1）测定方法：连续监测法 （2）测定原理：在pH=10的环境中，ALP催化磷酸二苯钠的水解，生成苯酚和磷酸氢二钠，苯酚与4-氨基安替比林反应生成色素原，该色素原经铁氰化钾氧化生成红色醌亚胺衍生物。测定红色物质的吸光度就可以计算酶活力的大小。 临床意义：临床上测定ALP主要用于骨骼、肝胆系统疾病的诊断和鉴别诊断，尤其是黄疸的鉴别诊断。对于不明原因的高ALP血清水平，可测定同工酶以协助明确其器官来源。 生理性增高。儿童在生理性的骨骼发育期，碱性磷酸酶活力可比正常人高1～2倍。处于生长期的青少年，以及孕妇和进食脂肪含量高的食物后均可以升高。 2.病理性升高（1）骨骼疾病如佝偻病、软骨病、骨恶性肿瘤、恶性肿瘤骨转移等；（2）肝胆疾病如肝外胆道阻塞、肝癌、肝硬化、毛细胆管性肝炎等；（3）其他疾病如甲状旁腺机能亢进。3.病理性降低见于重症慢性肾炎、儿童甲状腺机能不全、贫血等。 乳酸脱氢酶LDH 测定方法：连续监测法、比色法、荧光法。 测定原理：乳酸脱氢酶(LDH)在辅酶I的递氢作用下，使乳酸脱氢而生成丙酮酸。氧化型辅酶I（NAD+）还原成还原型的辅酶I（NADH），引起340nm处吸光度的改变，其吸光度的增加速率与标本中LDH浓度成正比。 临床意义： 用于AMI和亚急性MI的辅助诊断：AMI后8～18小时开始升高，peaktim为24～72小时，持续时间6～10天。AMI时LD的升高倍数多为5～6倍，个别可高达10倍。 由于LD特异性低，通常可