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影响血液凝固的因素 ◆ 实验目的及意义 血液凝固就是血液由流体状态转变为凝胶状态的过程，是一系列复杂的生物化学反应过程。凝血过程主要包括三个阶段： 凝血酶原激活物前体 凝血酶原激活物 凝血酶 凝血酶原 纤维蛋白 纤维蛋白原 ◆ 实验目的及意义 凝血系统包括内源性凝血系统和外源性凝血系统两种： 内源性凝血系统是指参与凝血过程的因子，全部存 在于血浆中。 外源性凝血系统是指参与凝血过程的因子，为存在于组织中的组织因子。 凝血过程受到多种理化因素的影响：凝血因子、温度、接触面的光滑程度等。 了解血液凝固的基本过程和影响血液凝固的因素，学习测定血液凝固的方法。 ◆ 实验对象与器材 家兔、哺乳动物手术器械、兔手术台、注射器、动脉夹、动脉插管、棉线、试管、试管架、秒表、恒温水浴（40℃、10℃各一）、玻棒、细玻璃粉、25％乌拉坦、小鼠脑组织浸出液、0.1％肝素、2％草酸钾、2％氯化钙 ◆ 实验步骤 药品准备： 取9支试管，标记后置于试管架上，按下表将各种物质或药品加入相应的试管内备用。 ◆ 实验步骤 动物麻醉及颈部手术： 取一只动物，称重。按1g/kg体重的剂量将乌拉坦（氨基甲酸乙酯）由耳缘静脉缓慢注入，观察动物肌张力、呼吸与角膜反射的变化。动物麻醉后背位固定于兔手术台上。 剪去颈部手术野的毛，沿颈正中线在喉头上一指至锁骨上一指的地方作一5～7cm的皮肤切口。分离皮下组织及肌肉。 ◆ 实验步骤 动脉插管： 在气管两侧辨别并分离颈总动脉，颈总动脉下方穿两条线备用。 在左侧颈总动脉的近心端夹一动脉夹，在动脉夹远心端距动脉夹约3cm处结扎。用小剪刀在结扎线的近侧（结扎线与动脉夹之间）沿向心方向剪一小斜口（约占管径的一半），向心脏方向插入动脉插管，由备用的线结扎固定。取血时将动脉夹松开即可。 ◆ 实验步骤 观察、记录凝血时间： 打开兔颈总动脉夹，血液从动脉插管流出，弃去第一份1mL动脉血后，向每个试管中注入1mL兔动脉血，并摇匀。 自血液流出动脉插管开始计时。除第1管外，其他各管每隔15秒钟将试管倾斜一次，观察液面是否倾斜即血液是否流动，直到试管内血液不再流动为止，记录凝血时间。 当第2管已经凝固时，再倾斜第1管看血液是否凝固，若尚未凝固则按上述方法每隔15秒钟倾斜一次，直到血液凝固为止，记录凝血时间，即为该兔血的凝固时间。 以第2管为对照，各管观察其他各管中血液凝固时间。 向第9管中滴加2％氯化钙2滴，观察血液是否凝固。 取出第5管中的玻棒，用水洗净，观察附着在玻棒上的纤维蛋白。 ◆ 注意事项 同一实验组同学要进行合理分工，密切合作，严格控制各个试管的实验条件。 取放试管时要用拇指和食指捏住试管的上端，不要握住试管的底部，以免手的温度影响结果。 每支试管口径及采血量要尽量一致，不可相差太大。 记录凝血时间要准确。 判断凝血的标准要前后一致。一般以倾斜试管达45°时，试管内血液不见流动为准。 ◆ 创新与探索 试设计实验观察人体尿生成的质与量。 下次实验内容 家兔动脉血压的神经体液调节 影响尿生成的因素 请提前预习。 ◆ 实验步骤 颈部手术： 气管插管 沿颈部正中线在喉头上一指至锁骨上一指的地方作一个5～7cm的皮肤切口。钝性分离皮下组织及肌肉，暴露、分离气管。在气管下方穿一根粗结扎线，于甲状软骨下方2～3cm处（第三与第四软骨环之间）作“⊥”形切口，插入气管插管，结扎固定。 分离颈部神经和血管 在气管两侧辨别并分离颈总动脉、迷走神经、交感神经、减压神经，在右侧迷走神经下方穿线备用。分离时特别注意不要过渡牵拉，并随时用生理盐水润湿。左侧颈总动脉下方穿两条线备用。 插动脉插管 在左侧颈总动脉的近心端夹一个动脉夹，并在动脉夹远心端距动脉夹约3cm处结扎。用眼科剪在结扎线与动脉夹之间沿向心方向剪一个楔形切口（约占管径的一半），向心脏方向插入动脉插管，由备用的线结扎固定。小心松开动脉夹，即可见血液冲进动脉插管。 * * 竹签搅拌（6滴生理盐水） 9 置于10℃水浴（6滴生理盐水） 8 置于40℃水浴（6滴生理盐水） 7 脑组织浸出液（6滴） 6 细玻璃粉少许（6滴生理盐水） 5 室温（6滴生理盐水） 4 室温（6滴生理盐水） 3 加入2％草酸钾溶液0.1mL （6滴） 2 加入0.1％肝素溶液0.1mL（6滴） 1 凝血时间 实验条件 试管号 ◆ 关键技术  取血体积的准确程度。